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CheKine™ 葡萄糖 - 6 - 磷酸(6PG)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)

來(lái)源:亞科因(武漢)生物技術(shù)有限公司   2025年05月19日 17:14  

一,、試劑盒概述

CheKine™ 葡萄糖 - 6 - 磷酸(6PG)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)是一種用于檢測(cè)生物樣本中 6PG 含量的工具,。6PG 是糖酵解和磷酸戊糖途徑的關(guān)鍵中間產(chǎn)物,在糖代謝中具有重要作用,。通過(guò)檢測(cè) 6PG 含量,,可以深入了解細(xì)胞的糖代謝狀態(tài),為代謝研究,、疾病診斷等提供重要數(shù)據(jù),。

二、檢測(cè)原理

在該試劑盒中,,6PG 在 6 - 磷酸葡萄糖脫氫酶的催化下與 NADP?反應(yīng)生成 6 - 磷酸葡萄糖酸和 NADPH,。NADPH 在 1 - mPMS 的作用下使 WST - 8 顯橙黃色,且顏色深淺與 6PG 含量成正比,。通過(guò)測(cè)定 450 nm 處的吸光值,,可準(zhǔn)確計(jì)算 6PG 含量。

三,、實(shí)驗(yàn)步驟

(一)樣本準(zhǔn)備

  1. 組織樣本 :稱取適量組織,用預(yù)冷生理鹽水洗滌,,按質(zhì)量體積比加入裂解液,,冰上勻漿后離心取上清。
  2. 細(xì)胞樣本 :收集細(xì)胞,,生理鹽水洗滌后,,加入裂解液吹打混勻,冰上裂解后離心取上清。
  3. 液體樣本 :血清,、血漿樣本直接離心取上清,;尿液等其他液體樣本過(guò)濾去除雜質(zhì)后即可檢測(cè)。

(二)試劑準(zhǔn)備

  1. 試劑配制 :按說(shuō)明書(shū)配制工作液,、顯色液和酶溶液,,使用前充分混勻,。
  2. 試劑預(yù)冷 :將配制好的試劑置于冰上預(yù)冷,,減少非特異性反應(yīng),。

(三)反應(yīng)體系設(shè)置

  1. 體系構(gòu)建 :在微量反應(yīng)板中依次加入樣本,、工作液、顯色液和酶溶液,,輕輕混勻。
  2. 反應(yīng)條件 :37℃孵育 30 分鐘左右,使反應(yīng)充分進(jìn)行,。

(四)檢測(cè)

  1. 吸光度檢測(cè) :使用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定反應(yīng)體系的吸光值。
  2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 :用標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以確定樣本中 6PG 的含量,。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果解讀

  1. 含量計(jì)算 :根據(jù)吸光值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 6PG 的含量。
  2. 結(jié)果分析 :6PG 含量可反映糖代謝狀態(tài),,如在糖尿病等代謝疾病中,6PG 含量可能異常,。
  3. 注意事項(xiàng) :嚴(yán)格控制反應(yīng)條件,避免交叉污染,,設(shè)置對(duì)照組以確保結(jié)果的可靠性,。

五、應(yīng)用領(lǐng)域

該試劑盒適用于多個(gè)領(lǐng)域,,包括代謝研究,、疾病研究、食品分析和生物技術(shù)等,,可用于檢測(cè)動(dòng)植物組織,、細(xì)胞、血清,、血漿和尿液等樣本中的 6PG 含量,,助力科研和實(shí)際應(yīng)用。



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