厭氧培養(yǎng)箱是用于培養(yǎng)厭氧微生物的關(guān)鍵設(shè)備,使用時需嚴格遵守操作規(guī)范以確保實驗結(jié)果的準確性和人員安全,。以下是主要注意事項:
一,、操作前準備
1. 檢查氣源
確認氮氣,、氫氣,、二氧化碳氣瓶壓力充足(通常需≥2MPa),,氣體純度≥99.99%,避免雜質(zhì)影響厭氧環(huán)境,。
檢查氣體管道連接是否密封,,防止泄漏。
2. 預(yù)還原培養(yǎng)基
培養(yǎng)基使用前需煮沸驅(qū)氧并迅速冷卻,,或添加還原劑(如半胱氨酸,、刃天青指示劑),確保無氧狀態(tài),。
3. 設(shè)備密封性檢查
關(guān)閉艙門后,,用肥皂水檢測接口和手套是否有漏氣(氣泡產(chǎn)生),,確保密封性。
二,、操作過程注意事項
1. 嚴格除氧程序
先通入氮氣置換空氣(3 5次循環(huán)),,再通入混合氣體(如N?:CO?:H?=85:10:5),最后通過鈀催化劑去除殘余氧氣,。
使用氧濃度檢測儀確認艙內(nèi)O?濃度<1%(理想值<0.1%),。
2. 樣品傳遞規(guī)范
使用專用傳遞艙:先抽真空再充氮氣(重復2 3次),,避免氧氣進入主艙,。
傳遞物品需表面消毒,減少污染風險,。
3. 溫度與濕度控制
維持培養(yǎng)溫度(通常35 37℃),,濕度建議60 80%,防止培養(yǎng)基干燥,。
4. 安全操作
禁止明火:氫氣為易r氣體,,操作時關(guān)閉火源。
戴手套避免直接接觸培養(yǎng)物,,防止生物污染,。
三、日常維護
1. 催化劑活化
鈀催化劑(除氧劑)每2 3個月于160℃烘烤2小時再生,,失效時需更換(顏色變深或除氧效率下降),。
2. 清潔與消毒
每周用75%酒精或?qū)S孟緞┎潦门擉w內(nèi)壁、手套和傳遞艙,。
污染時立即停機,,滅菌(如過氧化氫熏蒸)。
3. 定期檢查
檢查壓力表,、傳感器,、電磁閥是否正常,氣體流量是否穩(wěn)定,。
四,、常見問題處理
氧氣泄漏:立即關(guān)閉氣源,檢查密封圈或手套是否破損,。
培養(yǎng)污染:排查傳遞艙滅菌是否手套是否有裂縫,。
設(shè)備報警:記錄錯誤代碼,聯(lián)系廠家技術(shù)支持,,勿自行拆解,。
五、安全警示
氫氣風險:保持通風,,安裝氫氣檢測報警器,,避免濃度≥4%(爆炸下限),。
生物安全:處理病原微生物時需符合實驗室生物安全等級要求(如BSL 2)。
正確使用和維護厭氧培養(yǎng)箱可延長設(shè)備壽命并確保實驗可靠性,。建議定期培訓操作人員,,并保存完整的設(shè)備使用記錄。
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