小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）ELISA檢測試劑盒

Murine Hepcidin Compete^TM ELISA

背景簡介：

Ganz及其團(tuán)隊在研究抗菌肽時發(fā)現(xiàn)肝臟合成的鐵調(diào)素（Park等，2001）,。隨后Pigeon、Nicolas等研究者共同證實（Pigeon等,，2001,；Nicolas等，2001）,，這種肽類激素能通過感知飲食鐵含量,、系統(tǒng)鐵負(fù)荷、貧血,、缺氧,、紅細(xì)胞生成及炎癥等變化來調(diào)控細(xì)胞外鐵水平（Ganz，2005）,。鐵調(diào)素作為急性期反應(yīng)蛋白,，在炎癥性貧血中表達(dá)升高。白細(xì)胞介素-6（IL-6）是炎癥過程中調(diào)控鐵調(diào)素的關(guān)鍵因子（Nemeth等,，2004）,。其作用機(jī)制是通過結(jié)合已知的鐵通道——膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ferroportin）并誘導(dǎo)其降解，從而抑制細(xì)胞鐵外流,。動物實驗表明,，注射合成鐵調(diào)素可快速降低小鼠血清鐵水平（Rivera等，2005）?，F(xiàn)有研究已明確鐵調(diào)素是脊椎動物體內(nèi)鐵穩(wěn)態(tài)的核心調(diào)控因子,。

目前尚未建立常用小鼠模型品系（如C57BL/6）循環(huán)系統(tǒng)中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1）蛋白的正常參考值范圍。已知小鼠hepc-1蛋白水平與其飼料鐵濃度呈顯著正相關(guān),，且與qPCR檢測的hepc-1基因表達(dá)量具有一致性（Gutschow等,，2015）。

檢測原理：

本試劑盒采用基于競爭結(jié)合ELISA原理,。檢測時,，將小鼠樣本,、標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌放c含有hepc-1生物素結(jié)合物的緩沖液混合，隨后轉(zhuǎn)移至包被抗小鼠hepc-1抗體的ELISA微孔板中孵育,。樣本中天然鐵調(diào)素（hepcidin）與hepc-1生物素結(jié)合物競爭抗體結(jié)合位點,，因此樣本中hepc-1含量越高，微孔中結(jié)合的生物素結(jié)合物越少,。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合物后,，通過鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過氧化物酶（HRP）檢測抗體結(jié)合的hepc-1生物素結(jié)合物。加入顯色底物TMB后,，結(jié)合量可通過顯色反應(yīng)定量—反應(yīng)生成藍(lán)色產(chǎn)物,，加入終止液后在450nm波長下測定吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，顯色強(qiáng)度與樣本中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1）濃度呈負(fù)相關(guān)。完整檢測流程僅需2.75小時即可完成,。

產(chǎn)品描述：

產(chǎn)品應(yīng)用：

本試劑盒專用于小鼠血清和尿液中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1/hepc-1）的定量檢測,。該試劑盒不識別小鼠鐵調(diào)素-2（hepcidin-2/hepc-2），hepc-2的存在不影響hepc-1的檢測準(zhǔn)確性,。

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