人鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2（CAMK2）檢測原理

產(chǎn)品名稱：人鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2（CAMK2）檢測試劑盒

英文名稱：Human CAMK2 ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：XFH22351

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

儲存條件：2-8℃

有效期：6個月

用途：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2（CAMK2）的含量,。

本產(chǎn)品僅供科研實驗用，不做其他用途,！

檢測原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被人鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2（CAMK2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹-底洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2（CAMK2）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

樣品收集,、處理及保存方法

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,，不得使用疊氮鈉做為防腐劑,。

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激,，將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復凍融,。

3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復凍融,。

4.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎,，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測,。

注：標本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。