類(lèi)器官培養(yǎng)試劑選擇請(qǐng)記住這三個(gè)黃金法則
各位科研伙伴,類(lèi)器官培養(yǎng)試劑選擇記住三個(gè)黃金法則,,2 分鐘掌握關(guān)鍵 ——
一,、基質(zhì)膠:搭好三維 “腳手架”
天然基質(zhì)(如 Matrigel)像真實(shí)細(xì)胞外基質(zhì),選它看兩點(diǎn):
? 硬度適配:腸類(lèi)器官用軟基質(zhì)(濃度 1.2-2.4 mg/mL),肝類(lèi)器官用中等硬度,別搞錯(cuò),!
? 批間穩(wěn)定:必須選低內(nèi)毒素(<5 EU/mL),、無(wú)支原體的批次,到手先測(cè)成球率,,1000 個(gè)細(xì)胞 72 小時(shí)成球>80% 才合格。
合成基質(zhì)(如 PEG 水凝膠)成分純、無(wú)動(dòng)物源,,適合培養(yǎng)或研究基質(zhì)單獨(dú)作用。
二,,培養(yǎng)基:配好營(yíng)養(yǎng) “信號(hào)餐”
基礎(chǔ)培養(yǎng)基按器官選:腸胃用 MEM/NEAA,,肝腎用 DMEM/F12,都要無(wú)酚紅,、低糖版,。
關(guān)鍵生長(zhǎng)因子是靈魂:
? 腸肺類(lèi)器官離不開(kāi) Wnt 激動(dòng)劑(R-spondin 1+Noggin),純度>95% 才有效,;
? 分化期加對(duì)應(yīng)因子,,比如腎類(lèi)器官加 BMP-7,胰腺類(lèi)器官抑制 TGF-β,,濃度隨階段調(diào),。
傳代時(shí)加 Y-27632,24 小時(shí)內(nèi)提高貼壁存活率,,新手可用,!
三,質(zhì)量控制:避開(kāi)試劑 “雷區(qū)”
? 安全性:內(nèi)毒素<1 EU/mL(高了類(lèi)器官會(huì)發(fā)炎),,無(wú)菌檢測(cè)做 14 天,,支原體用 MycoAlert 快篩;
? 功能性:成球率>80%,,還要有典型結(jié)構(gòu)(比如腸類(lèi)器官長(zhǎng)隱窩),,測(cè)基因確保沒(méi) “長(zhǎng)歪”,;
? 批間穩(wěn)定:同一批試劑傳 10 代以上,別讓類(lèi)器官越養(yǎng)越差,。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。