二手ABI QuantStudio™ 5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)評(píng)估與應(yīng)用介紹

一、儀器概述

QuantStudio™ 5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀由Applied Biosystems（現(xiàn)隸屬于賽默飛Thermo Fisher Scientific）推出,，是QuantStudio系列中一款定位于中通量,、功能完備,、界面友好的定量PCR平臺(tái),。該設(shè)備兼具96孔與384孔反應(yīng)模塊的可選性,，采用LED光源和先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),，可滿足多種常規(guī)核酸檢測(cè)與表達(dá)分析任務(wù),。

對(duì)于采購(gòu)二手設(shè)備的用戶而言,，QuantStudio 5憑借結(jié)構(gòu)緊湊、性能穩(wěn)定,、操作軟件直觀等特征,，具有較高的再利用價(jià)值，在高校實(shí)驗(yàn)室,、生物技術(shù)公司及第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)中仍有較大使用需求,。

二、技術(shù)參數(shù)與系統(tǒng)結(jié)構(gòu)

1. 溫控性能

• 模塊類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔鋁模塊（0.2 mL 反應(yīng)孔）,；

• 升降溫速率：升溫約3.5°C/s,，降溫約3.0°C/s；

• 溫控準(zhǔn)確性：±0.25°C,；

• 溫度均一性：<0.4°C（在90秒保持期內(nèi)）,；

• 熱蓋溫度范圍：30°C–105°C，可調(diào)節(jié)壓力以適配不同封膜,。

2. 光學(xué)系統(tǒng)

• 激發(fā)光源：高強(qiáng)度LED,；

• 檢測(cè)方式：多通道熒光檢測(cè)系統(tǒng)（最多支持6個(gè)通道）；

• 支持染料：FAM™, VIC®, SYBR® Green, ROX™, TAMRA™, JOE™, HEX™等,；

• 采集方式：每循環(huán)末實(shí)時(shí)采集熒光信號(hào),，光學(xué)無接觸掃描；

• 校正機(jī)制：自動(dòng)進(jìn)行熒光漂移和參考染料校正（ROX為推薦參考）,。

3. 兼容耗材

• 96孔板（0.2 mL,，快裝板或獨(dú)立管）；

• 高透明封膜,、粘蓋膜、光學(xué)蓋板,；

• 建議使用原廠或兼容性測(cè)試合格耗材,，避免因孔位不一致影響光路。

三,、軟件與數(shù)據(jù)處理功能

QuantStudio Design & Analysis 軟件為該系統(tǒng)配套軟件,，支持多種實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果分析模式：

1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 預(yù)設(shè)模板：絕對(duì)定量、相對(duì)定量、SNP分析,、標(biāo)準(zhǔn)曲線,、熔解曲線分析等；

• 自定義程序編排：設(shè)置循環(huán)參數(shù),、熒光采集時(shí)間點(diǎn),；

• 多用戶賬戶系統(tǒng)，便于管理大型實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)權(quán)限,。

2. 數(shù)據(jù)分析

• Ct值提取：自動(dòng)/手動(dòng)設(shè)定閾值,；

• 相對(duì)表達(dá)分析：支持ΔΔCt法，歸一化目標(biāo)基因表達(dá),；

• SNP判型：通過末端熒光強(qiáng)度判斷基因型,；

• 圖形輸出：擴(kuò)增曲線、熔解曲線,、熒光散點(diǎn)圖等可導(dǎo)出圖像,。

3. 遠(yuǎn)程控制與云平臺(tái)

• 通過Thermo Fisher Cloud遠(yuǎn)程設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、監(jiān)控運(yùn)行狀態(tài),；

• 可實(shí)現(xiàn)多臺(tái)設(shè)備數(shù)據(jù)集中管理與備份,；

• 支持移動(dòng)設(shè)備端口遠(yuǎn)程訪問（部分型號(hào)升級(jí)后可實(shí)現(xiàn)）。

四,、常見應(yīng)用方向

QuantStudio 5適用于基礎(chǔ)研究與應(yīng)用檢測(cè)的多種核酸實(shí)驗(yàn)：

1. 基因表達(dá)分析

• 利用SYBR或TaqMan探針,，評(píng)估不同處理下的mRNA表達(dá)；

• 可對(duì)多個(gè)目標(biāo)基因同時(shí)檢測(cè),，實(shí)現(xiàn)相對(duì)定量研究,。

2. SNP/突變檢測(cè)

• 適用于單堿基突變或小范圍結(jié)構(gòu)變異檢測(cè)；

• 支持等位基因判型（如AA,、AG,、GG）；

• 可拓展至個(gè)體化醫(yī)學(xué),、疾病篩查研究,。

3. 微生物/病毒載量檢測(cè)

• 檢測(cè)細(xì)菌、病毒,、支原體等特定病原體DNA/RNA,；

• 常用于環(huán)境檢測(cè)、疫病篩查和藥效評(píng)估,。

4. 拷貝數(shù)變異分析（CNV）

• 精確定量染色體片段或特定位點(diǎn)的DNA拷貝數(shù)變化,；

• 廣泛用于癌癥、遺傳病等研究,。

5. 農(nóng)產(chǎn)品/食品成分檢測(cè)

• GMO成分檢測(cè),；

• 動(dòng)植物來源成分識(shí)別,。

五、二手設(shè)備選購(gòu)注意事項(xiàng)

購(gòu)買二手QuantStudio 5系統(tǒng),，應(yīng)從以下維度評(píng)估設(shè)備狀態(tài)與價(jià)值：

1. 核心部件檢查

• 熱模塊是否升降溫穩(wěn)定（可進(jìn)行水測(cè)試）,；

• 光學(xué)通道校準(zhǔn)是否準(zhǔn)確；

• 是否有報(bào)錯(cuò)或通信中斷記錄,；

• 是否可成功運(yùn)行完整的熒光擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),。

2. 軟件與系統(tǒng)版本

• 是否包含正版授權(quán)的軟件（Design & Analysis）；

• 是否支持最新Win10系統(tǒng)或可升級(jí),；

• 云平臺(tái)功能是否激活,；

• 是否提供完整操作手冊(cè)與驅(qū)動(dòng)包。

3. 外觀與配件

• 主機(jī)外殼是否破損,、按鍵功能是否失靈,；

• 是否提供原廠或合格的96孔模塊；

• 配套的反應(yīng)板托架,、封膜壓蓋器是否齊全,。

4. 歷史記錄

• 設(shè)備出廠時(shí)間與使用年限；

• 是否經(jīng)過正規(guī)授權(quán)商維修,；

• 是否有校準(zhǔn)與維護(hù)記錄,；

• 是否經(jīng)過污染清洗和溫控/光學(xué)檢測(cè)校準(zhǔn)。

六,、設(shè)備適配場(chǎng)景評(píng)估

作為一款定位于中通量科研與臨床研究的實(shí)時(shí)熒光PCR平臺(tái),，QuantStudio 5適合以下機(jī)構(gòu)與用途：

相較全新設(shè)備,，二手QuantStudio 5在預(yù)算有限場(chǎng)景下,，提供了一種可行解決方案，只要設(shè)備狀態(tài)良好并有可追溯維修記錄,，能維持相當(dāng)水平的實(shí)驗(yàn)性能,。

七、結(jié)語

ABI QuantStudio 5 實(shí)時(shí)定量PCR儀以其可靠的溫控系統(tǒng),、靈敏的熒光檢測(cè)機(jī)制,、便捷的圖形化軟件及良好的通用性，在多種核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中被廣泛采用,。若評(píng)估通過,，選購(gòu)二手設(shè)備可在控制成本的同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)需求。

在實(shí)際購(gòu)置前,，建議要求賣方提供以下資料以作進(jìn)一步判斷：

• 儀器序列號(hào)及出廠年份,；

• 運(yùn)行日志截圖；

• 最近一次擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的報(bào)告,；

• 售后服務(wù)與運(yùn)輸保障條款,。