樣品特性

• 樣品量

• 若樣品量充足,，如進行大量蛋白質(zhì)粗提物的分析,，需要上樣較大體積樣品，可選擇齒深較深的梳子,，以容納足夠的樣品,。

• 對于微量樣品，如 DNA 樣本或少量細胞裂解后的蛋白質(zhì)樣品,，淺齒梳子即可滿足需求,，避免因加樣孔過大導致樣品分散。

• 樣品分子量

• 分離高分子量的 DNA 或蛋白質(zhì)時,，深齒梳子提供的分離空間更有利于大分子的遷移,，減少空間位阻，使分離效果更好,。例如在脈沖場凝膠電泳分離超大分子量 DNA 時,，常使用深齒梳子,。

• 對于小分子量的樣品，如短片段 DNA 或低分子量蛋白質(zhì),，淺齒梳子能限制樣品擴散,，使條帶更清晰，便于準確分析,，如在 DNA 測序?qū)嶒炛?，一般選擇淺齒梳子。

實驗目的

• 定性分析

• 若是進行簡單的樣品存在性檢測或粗略的條帶觀察,，對條帶的精確性要求不高,，深齒梳子和淺齒梳子都可使用。但如果樣品量少,，淺齒梳子更合適,；若要同時檢測多個樣品且樣品量充足，深齒梳子可提高效率,。

• 定量分析

• 進行精確的定量分析,，如測定蛋白質(zhì)的表達量或 DNA 的濃度，需要條帶清晰,、準確,，此時淺齒梳子更為合適，它能提供更準確的條帶位置和形態(tài),，有利于后續(xù)的圖像分析和數(shù)據(jù)處理,。

儀器設備

• 電泳槽規(guī)格

• 小型電泳槽由于凝膠面積和厚度有限，通常適合搭配淺齒梳子,，以避免梳子過大對凝膠造成損傷,，同時也能保證電場的均勻性。

• 大型電泳槽凝膠面積大,、厚度厚,，可選擇深齒梳子，充分利用凝膠的分離空間,，同時也能適應較大的上樣量需求,。

凝膠類型與厚度

• 凝膠類型

• 對于聚丙烯酰胺凝膠，因其孔徑較小,，分離效果好,，常使用淺齒梳子，有助于獲得清晰的條帶,。例如在蛋白質(zhì)的 SDS - PAGE 電泳中,，一般采用淺齒梳子。

• 瓊脂糖凝膠孔徑較大，適合分離較大分子量的物質(zhì),，可根據(jù)樣品量和分離要求選擇齒深合適的梳子,。如果是分離大片段 DNA，可能深齒梳子更合適,；對于小片段 DNA 的常規(guī)檢測,，淺齒梳子即可。

• 凝膠厚度

• 較厚的凝膠可以承受更深的加樣孔,，適合使用深齒梳子,，能夠容納更多樣品，同時也能保證凝膠在電泳過程中的穩(wěn)定性,。

• 薄凝膠則適合淺齒梳子,，減少對凝膠結(jié)構(gòu)的破壞，防止在電泳過程中出現(xiàn)凝膠破裂或條帶變形等問題