一、分類

假單胞菌屬歸于假單胞菌科,，有200余種細(xì)菌,，其DNA的G+C的摩爾分?jǐn)?shù)為58％～71％，主要包括銅綠假單胞菌（P.aeruginosa) ,熒光假單胞菌（P.fluorescens),、惡臭假單胞菌（P.putica),、斯氏假單胞菌（P.stutizeri)、產(chǎn)堿假單胞菌（P.alcaligenes）等,。

二,、生物學(xué)特性

假單胞菌屬為革蘭陰性桿菌，菌體直或微彎,，無芽胞,、無莢膜,，有單鞭毛（銅綠假單胞菌、斯氏假單胞菌,、產(chǎn)堿假單胞菌）或叢鞭毛（熒光假單胞菌,、惡臭假單胞菌），運動活潑,。

本屬細(xì)菌專性需氧,，生長溫度范圍廣，生長溫度35℃（熒光假單胞菌25℃）,，少數(shù)細(xì)菌可在4℃（熒光假單胞菌）或42℃（銅綠假單胞菌,、斯氏假單胞菌）生長，可以此來鑒別細(xì)菌,。細(xì)菌生長的pH 5.0～9.0,，pH值為7.0。營養(yǎng)要求不高,，在普通培養(yǎng)基上均可生長,，可產(chǎn)生多種水溶性色素，主要有綠膿素（pyocyanin)和青膿素（pyoverdin),，青膿素在360 nm紫外光下可發(fā)出黃綠色熒光,，故又稱熒光素。各種假單胞菌產(chǎn)生的色素見表17-2,。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長,，常在其表面形成菌膜。在麥康凱平板上生長良好,，各種菌在血平板上形成不同的菌落特征,，根據(jù)生長特性可進(jìn)行初步鑒定。

銅綠假單胞菌在普通平板上形成的菌落扁平濕潤,、大小不一,、邊緣不整齊、常呈融合狀生長,，所產(chǎn)生的綠膿素和熒光素使培養(yǎng)基被染成藍(lán)綠色或黃綠色,，從臨床標(biāo)本中分離的菌株有80％～90％可產(chǎn)生綠膿素或熒光素。在血平板上生長后有生姜樣氣味,，形成扁平濕潤,、有金屬光澤的菌落，常呈β溶血,。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上,，24 h可形成半透明菌落，48 h后菌落中心呈棕綠色。來自肺囊性纖維化患者的菌株常形成M型菌落,。

熒光假單胞菌在血平板上30℃孵育24 h后形成灰白色、扁平稍隆起,、濕潤,、光滑、邊緣整齊的菌落,，無溶血,，挑取菌落呈黏絲狀。

斯氏假單胞菌在血平板上24 h長出1 mm大小菌落,，大多數(shù)菌落干燥,、有皺紋、粗糙,、扁平,，淡黃色或黃棕色，堅韌而黏附平板,；少數(shù)菌落光滑,、濕潤，大部分產(chǎn)生透明溶血環(huán),。多次轉(zhuǎn)種后光滑型菌落增多,，呈遷徙生長及擴散。

在血平板上產(chǎn)堿假單胞菌和惡臭假單胞菌都形成光滑,、濕潤,、邊緣整齊的灰色菌落，無溶血,。

三,、臨床意義

假單胞菌屬分布廣泛，土壤,、水和空氣中均有存在,，屬于條件致病菌。人感染主要來源于環(huán)境,、污染的醫(yī)療器械,、輸液或注射等，成為醫(yī)院感染的主要病原菌,。在人類非發(fā)酵菌感染中,，假單胞菌屬占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌,，其次為惡臭假單胞菌,、熒光假單胞菌等。

銅綠假單胞菌不僅廣泛存在于環(huán)境中，也存在于正常人體的腸道,、皮膚及外耳道,，當(dāng)宿主正常的防御機制被改變或損傷時，如燒傷,、留置導(dǎo)尿管,、氣管切開插管等，以及免疫機制缺損時,，如患者等,，可導(dǎo)致皮膚、呼吸道,、泌尿道,、眼部等感染。當(dāng)細(xì)菌毒力強,、數(shù)量多而機體抵抗力降低時,，細(xì)菌可在血中繁殖引起敗血癥、腦膜炎,。

從傷口,、痰、胸腔積液,、尿或血液中可分離出熒光假單胞菌,。由于熒光假單胞菌具有嗜冷性，可在血庫儲存的血中繁殖,，若輸入含有此種細(xì)菌的庫存血液或血制品,，可導(dǎo)致敗血癥、感染性休克或血管內(nèi)凝血等嚴(yán)重后果,，其內(nèi)毒素的磷脂部分可導(dǎo)致輸血后不可逆的休克,。

惡臭假單胞菌為魚的一種致病菌，常從的魚中檢出,，也可作為人類咽部的正常菌群,，是人類少見的條件致病菌，偶從少,、類尿道感染,、皮膚感染和骨髓炎標(biāo)本中分離出，分泌物有腥臭味,。惡臭假單胞菌感染通常病情較重,，因為該菌自溶后釋放出內(nèi)毒素而致中毒癥狀。

斯氏假單胞菌在人類的呼吸道,、泌尿道均可發(fā)現(xiàn),，為條件致病菌,，可引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染，如呼吸道感染,、中耳炎,、關(guān)節(jié)炎、尿路感染及敗血癥等,。

產(chǎn)堿假單胞菌廣泛存在于多種水源中,，是醫(yī)療用水污染的主要原因。產(chǎn)堿假單胞菌如污染新生兒溫箱濕化用水和氧氣濕化用水,，極容易導(dǎo)致新生兒呼吸道感染甚至敗血癥等。產(chǎn)堿假單胞菌還可引起化膿性腦膜炎,、尿道炎,、肺炎等感染性疾病。

四,、微生物學(xué)檢驗

1,、檢驗程序非發(fā)酵菌檢驗程序見圖17-1。

圖17-1非發(fā)酵菌檢驗程序

2,、標(biāo)本采集假單胞菌屬感染常見標(biāo)本有血液,、腦脊液、胸腹水,、膿液,、分泌液、痰,、尿液等,。進(jìn)行醫(yī)院感染監(jiān)測時，標(biāo)本主要為病區(qū)或手術(shù)室的空氣,、水,、地面、把手,、醫(yī)療診斷器械及生活用品,。

3、直接顯微鏡檢查取標(biāo)本直接涂片,、革蘭染色,，鏡下可見革蘭陰性桿菌，散在排列,，無芽胞,。

4、分離培養(yǎng)臨床感染標(biāo)本一般直接接種于血平板及麥康凱平板,，血液,、腦脊液標(biāo)本經(jīng)增菌后再轉(zhuǎn)種于血平板,。

5、鑒定假單胞菌屬的主要特征：革蘭陰性桿菌,，專性需氧,，在血平板和麥康凱培養(yǎng)基上生長良好，通常產(chǎn)生明顯的水溶性色素,。氧化酶陽性,，葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(O/F試驗）為氧化型或產(chǎn)堿型，端生單或叢鞭毛,，據(jù)此可與非發(fā)酵菌其他屬相區(qū)別,。進(jìn)一步做系列生化試驗進(jìn)行菌種鑒定。具體見表17-3,。

表17-3臨床常見假單胞菌的鑒定特征

注：＋表示90％以上陽性,；一表示90％以上陰性；V表示不定,。

在臨床微生物實驗室,，假單胞菌屬細(xì)菌的鑒定常采用商品化的試劑盒，以及全自動或半自動的細(xì)菌鑒定系統(tǒng),。

從臨床標(biāo)本中分離出銅綠假單胞菌,，需要排除污染，從患者血液及無菌體液,、尿液中分離到本菌,，特別是反復(fù)檢出者，結(jié)合臨床表現(xiàn)即可確定為病原菌感染,。需連續(xù)三次痰培養(yǎng)陽性才能確立銅綠假單胞菌下呼吸道感染,，如患者無感染的臨床表現(xiàn)，雖然分離到銅綠假單胞菌亦應(yīng)作為正常菌群,。

6,、藥物敏感試驗 假單胞菌屬的細(xì)菌對有些抗生素天然耐藥，臨床治療假單胞菌感染的抗菌藥物主要有三類：β-內(nèi)酰胺類,、氨基糖苷類和喹諾酮類,。按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI）推薦，銅綠假單胞菌藥敏試驗可選用Kirby-Bauer法,。

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