ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術,。在檢測時,，受檢標本（測定其中的抗原）與固相載體表面的抗體反應。洗滌后加入酶標記的抗體,，通過反應結合在固相載體上,。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,，可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA實驗結果出現(xiàn)異常剖析：

一,、白板異常：顯色步驟結束后,，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色,。

1. 試劑已過效期,，或不同試劑盒組分混用；

解決方式：檢查試劑的組分及批號,，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒,。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。

2. 錯加,、漏加試劑底物,、顯色劑 A或B；

解決方式：嚴格按說明書的步驟操作,，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,，以減少漏加現(xiàn)象。

3. 洗板及加樣過程中,，酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力,；

解決方式：確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認配制洗液的容器已洗干凈,。

4. 終止液誤作洗滌液稀釋或當?shù)孜锞彌_液配制,；

解決方式：每次配制時都應看清標簽標明物質(zhì)。

5. 蒸餾水有問題,；

解決方式：確認配制洗液的純化水達到要求且未污染,，與好蒸餾水比較。

6. 顯色弱,、靈敏度低,。

解決方式：實驗結束后，包括陽性對照,、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡,。

二、陰陽性對照正常,，但質(zhì)控,、參考品或個別弱陽性標本未能檢出。

1. 未達要求的孵育溫度及孵育時間可檢出強陽性標本,，但質(zhì)控或弱陽性標本受 溫度變化影響較大而被未檢出,。

解決方式：質(zhì)控品或標本避免反復凍融。標本在一周內(nèi)使用的,，可存于 2-8℃,，如需長期保存，應置于-20℃以下保存,。質(zhì)控品應小量分裝,，并置于-20℃以下保存,。

2. 質(zhì)控品或標本高溫放置過久，或被反復凍融致待測物滴度下降,，而未能檢出,。

解決方式：重新設定酶標儀的參數(shù)，特別是檢查濾光片是否匹配,。

3. 儀器設定不正確,，濾光片不匹配。

解決方式：重新設定酶標儀的參數(shù),，特別是檢查濾光片是否匹配,。

三、實驗結束后,，陰陽性對照正常,，質(zhì)控正常，但標本感覺顯色較弱,。

1. 待測標本中可能不含強陽性標本,，故結果可能是正常的。

解決方式：如有懷疑,，可復檢,。

2. 標本加入疊氮鈉作為防腐劑。

解決方式：酶免實驗中的標本禁用疊氮鈉作為防腐劑,，可選用 proclin,、硫柳汞等其他防腐劑。