賽多利斯VN01H02 Sartorius Vivacon 500 超濾離心管用戶指南

——高效樣品濃縮與緩沖液置換的科研利器

一,、產(chǎn)品概述

賽多利斯VN01H02 Sartorius Vivacon 500 超濾離心管（貨號(hào)：VN01H02）是一款基于離心驅(qū)動(dòng)的超濾設(shè)備,，專為蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的濃縮,、脫鹽及緩沖液置換設(shè)計(jì),。該產(chǎn)品采用Hydrosart®再生纖維素超濾膜,，結(jié)合垂直膜與狹長(zhǎng)流道設(shè)計(jì),，可實(shí)現(xiàn)高回收率與低膜污染風(fēng)險(xiǎn)，適用于法醫(yī)鑒定,、生物制藥及基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。

二,、技術(shù)規(guī)格

• 膜材質(zhì)：Hydrosart®再生纖維素

• 截留分子量（MWCO）：10,000 Dalton

• 容量范圍：0.1–0.5 mL

• 操作溫度：4–40℃

• 離心兼容性：適配2.2 mL錐形底角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭

• 離心條件：

• 推薦轉(zhuǎn)速：≤7,500 × g（根據(jù)樣品類型調(diào)整）

• 最大耐受轉(zhuǎn)速：14,000 × g（短時(shí)）

• 回收率：≥90%（基于50 ng/mL DNA或0.25 mg/mL細(xì)胞色素c的測(cè)試數(shù)據(jù)）

三、核心優(yōu)勢(shì)

1. 高效濃縮

• 垂直膜設(shè)計(jì)配合狹長(zhǎng)流道,，避免濾膜阻塞,，顆粒含量高的溶液仍可實(shí)現(xiàn)快速超濾,。

• 示例：0.5 mL 50 ng/mL DNA溶液濃縮至20 μL，耗時(shí)僅25分鐘（7,500 × g）,。

2. 低膜污染

• Hydrosart®膜對(duì)化學(xué)物質(zhì)耐受性強(qiáng),，兼容SDS、Tris-HCl等緩沖體系,。

• 流道設(shè)計(jì)減少濃差極化,，延長(zhǎng)膜使用壽命。

3. 靈活應(yīng)用

• 支持DNA,、蛋白質(zhì),、肽等樣品的濃縮與脫鹽。

• 可選PCR級(jí)型號(hào)（如VN01H02-PCR）,，經(jīng)ETO滅菌處理,，消除痕量DNA污染。

四,、操作流程

（一）預(yù)處理

1. 潤(rùn)洗：

• 新管使用前,，加入超純水至膜上方，冰浴或4℃預(yù)冷5分鐘,，倒出液體,。

• 重復(fù)1次，確保膜潤(rùn)濕,。

2. 平衡：

• 將超濾管插入2.2 mL離心管中,，使用相同型號(hào)空管進(jìn)行離心平衡。

（二）加樣

1. 樣品量：

• 加入體積不超過(guò)管頂白線（通?！?00 μL）,。

• 示例：0.5 mL 1 mg/mL BSA溶液。

2. 離心：

• 4℃預(yù)冷離心機(jī),，設(shè)置轉(zhuǎn)速≤7,500 × g,，離心15–30分鐘。

• 示例參數(shù)：7,500 × g,、25分鐘（10,000 MWCO膜濃縮0.25 mg/mL細(xì)胞色素c）,。

（三）濃縮與回收

1. 濃縮判斷：

• 當(dāng)濾液體積接近1 mL時(shí)，取50 μL緩沖液+10 μL濾液,，通過(guò)Bradford法或電泳檢測(cè)蛋白泄漏,。

2. 緩沖液置換：

• 濃縮至1 mL后，加入等體積新緩沖液（經(jīng)0.22 μm過(guò)濾），重復(fù)離心3次,。

3. 終體積調(diào)整：

• 根據(jù)需求,，將樣品濃縮至≤500 μL（如需更高濃度，可降低轉(zhuǎn)速至說(shuō)明書推薦值以下）,。

（四）清洗與保存

1. 清洗：

• 使用后,，用超純水沖洗3次，再用75%乙醇沖洗1次,。

• 殘留水可通過(guò)1,000 × g離心1分鐘去除,。

2. 保存：

• 干燥后置于4℃或-20℃保存，避免膜干燥開(kāi)裂,。

五,、應(yīng)用案例

1. 蛋白質(zhì)濃縮

• 使用VN01H02將1 mL 0.5 mg/mL BSA濃縮至100 μL，回收率92%（7,500 × g,、10分鐘）,。

2. DNA脫鹽

• 0.5 mL 50 ng/mL DNA溶液經(jīng)3次緩沖液置換，鹽濃度從150 mM降至10 mM以下,。

3. 法醫(yī)樣本處理

• 從血液樣本中分離DNA,，結(jié)合VN01H02-PCR型號(hào)，消除設(shè)備痕量DNA污染,，確保PCR擴(kuò)增特異性,。

六、質(zhì)量控制與驗(yàn)證

1. 批次一致性：

• MWCO驗(yàn)證（電泳法）

• 回收率測(cè)試（BSA/DNA標(biāo)準(zhǔn)品）

• 膜完整性檢測(cè)（氣泡壓力法）

• 每批次提供CoA（Certificate of Analysis）,，包含：

2. 性能驗(yàn)證：

• 重復(fù)性測(cè)試（n=10）：BSA回收率CV≤3%,，DNA濃縮時(shí)間CV≤5%。

七,、注意事項(xiàng)

1. 操作安全：

• 避免膜干燥,，潤(rùn)濕后保持濕潤(rùn)狀態(tài)直至使用結(jié)束。

• 離心時(shí)確保轉(zhuǎn)子平衡,，防止離心機(jī)損壞,。

2. 樣品兼容性：

• 高粘度樣品（如甘油）需稀釋后使用。

• 強(qiáng)酸/強(qiáng)堿溶液可能腐蝕Hydrosart®膜,，需預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,。

3. 離心條件：

• 離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致蛋白沉淀，建議分步離心并監(jiān)測(cè)濾液狀態(tài),。