1.概述
藥物,，或一切化學(xué)品對細(xì)胞的生理狀態(tài)是否能造成影響，能造成多大的影響,，是生物學(xué)的基礎(chǔ)實驗之一。CCK-8與MTT等藥物毒性實驗就是一種測量方法,。我們都知道“脫離劑量談毒性都是耍潑皮”,，那么如何設(shè)置實驗中藥物的濃度呢？通常有兩種情形：

直接取一個固定的濃度，如40μM,；

設(shè)置一組濃度梯度,，如10μM、30μM,、100μM,。

這二者有什么不同？如何針對自己的實驗需求來選擇呢,？我們將在下文介紹,。

2 固定濃度的情形

一般來說，如果文獻(xiàn)直接甩出一個固定濃度進行實驗,，沒有進行量效測試,，說明這個藥物的效應(yīng)是已知的，就像數(shù)學(xué)答案里的“易得”,。

這個時候就應(yīng)該查找這段method中是否給出了引用文獻(xiàn),。效應(yīng)濃度已經(jīng)在更早期的實驗中確定了，該文章作者本人研究所用的細(xì)胞樣本應(yīng)該和早期文獻(xiàn)也能保持一致,，所以他是在復(fù)現(xiàn)實驗,，直接照做就可以了。

如果我們是在自己取值做實驗,，通常這個濃度可能可以從以下角度推導(dǎo)得到：

基于藥物的藥理學(xué)研究,，如藥代動力學(xué)參數(shù)：如果這是一個已知的藥物分子，我們不是第一次合成得到它,，第一次提出以它作為藥物的文獻(xiàn)應(yīng)該會提供其藥理學(xué)數(shù)據(jù),，如半衰期、分布容積等參數(shù),，可以基于研究實驗的目的計算決定,；

基于臨床用藥的習(xí)慣劑量：如果這個藥物已經(jīng)用于臨床了，可以參考臨床報告的劑量,；

直接抄以前的文獻(xiàn),，拿來吧你：這就是第一段所說的情況，已經(jīng)有人做實驗得到結(jié)論了,，那我們可以直接使用同種細(xì)胞進行進一步的研究,，反而保證了結(jié)論的可重復(fù)性。

3 濃度梯度的情形

如果一個文獻(xiàn)做了多個濃度或多個時間點來測試藥物效果,，那最大的可能是該文獻(xiàn)所研究的細(xì)胞或藥物此前沒人做過,，作者沒得引用，所以只能先做量效測評,。

所以此時設(shè)計上就要考慮做梯度濃度+不同時間段的設(shè)計,，從一系列實驗結(jié)果中找到濃度。

如何設(shè)計梯度和組別呢？如果有人做過類似的藥物或類似的細(xì)胞,，我們可以引用前人的智慧,，照搬之下再根據(jù)實驗?zāi)繕?biāo)作一定校正；如果沒參考對象,，我們可以從以下角度：

設(shè)置濃度梯度,，搞清楚IC50：先進行濃度梯度測試，用5-8個梯度去做預(yù)實驗,，比如每個梯度差別一倍（10,、20、40,、80,、160μM），總之要覆蓋藥物從低毒性到高毒性（甚至毒性過強導(dǎo)致細(xì)胞死亡）的濃度范圍,，據(jù)此分組測細(xì)胞毒性和增殖,，摸清楚這個藥物的IC50；（IC50計算可使用豆包或deepseek解決）

探索藥物有效劑量的范圍,，發(fā)現(xiàn)劑量-效應(yīng)之間的規(guī)律：基于IC50縮減劑量覆蓋的范圍,，設(shè)置更細(xì)化的分組，嘗試畫出藥效隨劑量增加而上升達(dá)到峰值,、然后隨劑量過量導(dǎo)致細(xì)胞死亡的曲線,。

原則即：找出藥物產(chǎn)生效應(yīng)的最佳濃度（閾值）以及不同濃度對細(xì)胞的影響趨勢。

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