檢測意義

1,、臨床上：觀測是否有腫瘤。

2,、工業(yè)客戶：間接考察細胞是否有成瘤的可能性,。

端粒酶活性檢測的主要方案

1、直接檢測端粒酶（蛋白及RNA的結(jié)合復合物）的活性,，檢測它是否可以延伸DNA模板,，然后跑膠或者探針雜交，檢測DNA延伸的長度,，以此來判斷端粒酶的活性高低,。

該方法操作較復雜，靈敏度不高,。

2,、間接檢測端粒酶（催化亞基的mRNA量）的活性。

該方法靈敏度高,，操作相對簡便,。

YH端粒酶活性檢測原理

雙色熒光探針分別檢測端粒酶催化亞基TERT基因mRNA和內(nèi)參基因GAPDH mRNA。在進行樣本檢測時,，同時檢測陽性細胞293T和陰性MRC-5細胞做為對照,，利用??CT法計算樣本中TERT基因的相對表達量。

檢測所用主要儀器

熒光定量PCR： Real Time PCR System(ABI 7500,，U.S.A)

RNA質(zhì)控：Nanodrop 2000C Spectrophotometer(Thermo scientific,，Germany）

檢測所用試劑

RNA抽提試劑盒：RNAiso Plus kit(Code No.9108/9109，TaKaRa,，Japan)

RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒： RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(00820611,，Thermo scientific，Germany)

雙色熒光TERT基因檢測試劑盒：上海翼和應用生物技術有限公司自研

陽性對照：293T細胞

陰性對照：MRC-5細胞（正常的人胚肺細胞）