Eaivelly透明八聯(lián)管用戶(hù)指南

——適用于熒光定量PCR的高性能實(shí)驗(yàn)耗材

一,、產(chǎn)品概述

Eaivelly透明八聯(lián)管（貨號(hào)：EA0202-2）是一款專(zhuān)為熒光定量PCR（qPCR）設(shè)計(jì)的高精度實(shí)驗(yàn)耗材，采用超薄壁聚丙烯（PP）材質(zhì),，搭配光學(xué)平蓋,，兼容Roche480、ABI7500,、Bio-Rad CFX96等主流PCR儀器,。其核心優(yōu)勢(shì)包括：

• 超薄壁設(shè)計(jì)：熱傳導(dǎo)效率提升20%，控溫精度達(dá)±0.1℃,，顯著縮短實(shí)驗(yàn)循環(huán)時(shí)間,。

• 無(wú)菌保障：經(jīng)γ射線(xiàn)輻照滅菌,，無(wú)DNase/RNase、無(wú)熱源,、無(wú)內(nèi)毒素,，避免樣本污染。

• 光學(xué)性能：透明平蓋透光率≥95%,，確保熒光信號(hào)采集無(wú)衰減,。

二、技術(shù)參數(shù)

三,、操作指南

1. 樣本制備

• 提取DNA/RNA后，使用Nanodrop檢測(cè)濃度,，確保模板濃度在10-100 ng/μL范圍內(nèi),。

• 避免反復(fù)凍融樣本，建議分裝后-80℃保存,。

2. 試劑混合

• 按實(shí)驗(yàn)需求配制PCR反應(yīng)體系（如2×SYBR Green Master Mix,、引物、模板DNA）,，渦旋混勻后離心,。

• 引物設(shè)計(jì)需避免二聚體形成，建議Tm值相差≤2℃,。

3. 加樣與密封

• 使用8道移液器將20 μL反應(yīng)體系均勻分配至八聯(lián)管各孔,，避免氣泡產(chǎn)生。

• 輕壓光學(xué)平蓋至貼合,，確保密封性,。

4. PCR程序設(shè)置

• 預(yù)變性：95℃ 5分鐘

• 循環(huán)階段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)）

• 溶解曲線(xiàn)：60℃→95℃，每0.5℃采集一次熒光信號(hào)

5. 數(shù)據(jù)分析

• 使用Bio-Rad CFX Manager或Roche LightCycler軟件分析Ct值和熔解曲線(xiàn),。

• 閾值設(shè)定建議為基線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)差的10倍,。

四、應(yīng)用場(chǎng)景

• 基因表達(dá)分析：如miRNA,、lncRNA的定量檢測(cè),。

• 病原體檢測(cè)：新冠、流感病毒核酸的熒光定量PCR,。

• 分子診斷：腫瘤標(biāo)志物（如KRAS,、EGFR）突變篩查。

五、質(zhì)量驗(yàn)證

1. 兼容性測(cè)試

• 在Roche480和ABI7500儀器上分別運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)實(shí)驗(yàn),，Ct值偏差≤0.3,。

2. 熱傳導(dǎo)性能

• 與普通八聯(lián)管對(duì)比，Eaivelly八聯(lián)管在95℃變性階段升溫速率提升15%（數(shù)據(jù)來(lái)源：上海易匯生物實(shí)驗(yàn)室）,。

3. 無(wú)菌驗(yàn)證

• 經(jīng)第三方機(jī)構(gòu)檢測(cè),，無(wú)菌率達(dá)100%，無(wú)DNase/RNase殘留,。

六,、注意事項(xiàng)

1. 防止污染

• 實(shí)驗(yàn)前使用75%乙醇擦拭操作臺(tái)面，避免使用含氯消毒劑,。

• 移液器吸頭需使用帶濾芯的型號(hào),。

2. 避免交叉污染

• 不同樣本間更換移液器槍頭，禁止重復(fù)使用,。

• 光學(xué)平蓋不可重復(fù)使用,，每次實(shí)驗(yàn)需更換新管。

3. 儲(chǔ)存條件

• 未開(kāi)封的八聯(lián)管需避光保存于干燥環(huán)境,，避免高溫高濕,。

七、常見(jiàn)問(wèn)題解答

• Q：熒光信號(hào)強(qiáng)度偏低如何解決,？
  A：檢查光學(xué)平蓋是否貼合緊密,，或更換透光率更高的品牌耗材,。

• Q：出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增如何優(yōu)化,？
  A：提高退火溫度至62-65℃，或調(diào)整引物濃度至0.2-0.4 μM,。

八,、供應(yīng)商信息

• 公司名稱(chēng)：上海易匯生物科技有限公司

• 代理政策：支持區(qū)域代理，提供市場(chǎng)推廣資料及試用裝支持,。

通過(guò)本指南,，科研人員可高效利用Eaivelly透明八聯(lián)管開(kāi)展熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和重復(fù)性,。如需進(jìn)一步技術(shù)支持,，請(qǐng)聯(lián)系供應(yīng)商獲取定制化解決方案。