Bio-Rad 1658033 小型垂直電泳轉印系統(tǒng)科研應用指南

——高效,、緊湊的蛋白/核酸分離與轉印一體化解決方案

一,、系統(tǒng)核心特性與創(chuàng)新設計

1.1 模塊化組件設計

電泳槽：

最大支持 10 cm × 10 cm 凝膠（2塊，厚度0.5-1.5 mm）

冷卻芯設計（溫升＜5℃/小時,，200V條件下）

轉印模塊：

半干轉/濕轉雙模式切換

最大轉印效率：＞90%（測試蛋白10-150 kDa）

1.2 關鍵性能參數(shù)

參數(shù)1658033系統(tǒng)常規(guī)小型系統(tǒng)

最大電壓500 V300 V

運行時間（SDS-PAGE）35分鐘（200 V）50-60分鐘

轉印面積20 cm210-15 cm2

緩沖液需求量300 mL（電泳）500 mL

1.3 適用研究場景

推薦應用：

? 快速蛋白篩查（如CRISPR編輯驗證）

? 低豐度核酸檢測（Northern blot）

? 教學實驗室高通量操作

二,、標準化操作流程

2.1 電泳步驟

復制

1. 凝膠安裝：

- 將預制膠卡入槽體，加入1×Running Buffer

- 避免緩沖液溢出（液面超過電極1 cm）

2. 上樣：

- 使用10 μL上樣槍頭（最大上樣量25 μL/孔）

3. 運行：

- 初始電壓80 V（濃縮膠）,，進入分離膠后調至120-150 V

2.2 半干轉印方案

步驟條件注意事項

膜/濾紙預處理浸漬轉印緩沖液10秒避免氣泡滯留

"三明治"組裝負極→濾紙/膠/膜/濾紙→正極戴手套操作

轉印參數(shù)15 V, 30分鐘分子量＞100 kDa需延長至45分鐘

三,、性能優(yōu)化與問題排查

3.1 電泳質量評估

合格標準：

? 蛋白Marker條帶清晰（無彌散）

? 前沿指示劑（溴酚藍）呈直線遷移

3.2 轉印效率驗證

Ponceau S染色法：

復制

1. 轉印后膜用0.1% Ponceau S染色5分鐘

2. 脫色后觀察：

- 合格：所有目標條帶可見

- 失敗：高分子量蛋白缺失（需延長轉印時間）

3.3 常見問題診斷

現(xiàn)象可能原因解決方案

條帶彎曲緩沖離子強度不均新鮮配制Running Buffer

轉印后信號弱甲醇濃度過高（＞20%）降低至10%甲醇

凝膠熔融電流過高/冷卻失效檢查冷卻循環(huán)系統(tǒng)

四,、技術問答（Q&A）

Q1：能否用于非變性蛋白電泳,？

需改用 Native PAGE緩沖液套裝（Cat. 1610738），并取消SDS

Q2：最小檢測蛋白量,？

配合高敏發(fā)光底物（如Clarity Max）可檢測 0.5 pg/band

文檔優(yōu)化建議：

插入 【電泳-轉印工作流程圖】 標注關鍵參數(shù)

添加 緩沖液配方二維碼（鏈接至Bio-Rad數(shù)據庫）

關鍵步驟用 ??警示框 強調（如"勿使用氯化鈉緩沖液"）