3 C57小鼠肝纖維化模型每周監(jiān)測
在肝纖維化模型建立過程中,每周系統(tǒng)監(jiān)測小鼠的體重,、活動度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進(jìn)展,、藥物干預(yù)效果及動物福利的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下為具體操作流程及注意事項:
3.1 監(jiān)測頻率與時間點
監(jiān)測頻率:每周固定時間點(如每周一上午9:00-11:00)監(jiān)測1次,。
監(jiān)測周期:
模型誘導(dǎo)期:DMN注射開始至建模完成(通常4-6周),。
干預(yù)治療期:給藥開始至實驗終點(通常4-8周)。
3.2 具體監(jiān)測方法與記錄標(biāo)準(zhǔn)
3.2.1 體重稱量
操作步驟:
1. 設(shè)備準(zhǔn)備:使用精度0.1 g的電子天平,,校準(zhǔn)歸零,。
2. 小鼠固定:
輕柔抓取小鼠尾部,將其置于專用稱量盒(底部鋪濾紙防滑),。
避免抓握腹部(可能加劇肝區(qū)疼痛),。
3. 稱量記錄:待數(shù)值穩(wěn)定后記錄體重(單位:g),精確至小數(shù)點后1位,。
4. 清潔消毒:每次稱量后用75%酒精擦拭稱量盒,,防止交叉污染。
5. 計算體重變化率} (%) = {本周體重} - {上周體重}}/{上周體重}} * 100%
6. 異常判定:
顯著下降:連續(xù)2周體重降幅≥10%,,或單周降幅≥15%,。
顯著上升:排除腹水后,,體重增幅≥20%(可能提示代謝異常)。
3.2.2 活動度評估
觀察指標(biāo):
自主活動:在開放場(如30 cm×30 cm透明箱)中觀察5分鐘,,記錄以下行為:
水平運(yùn)動:穿越區(qū)域次數(shù)(四肢全部進(jìn)入新區(qū)域計1次),。
垂直探索:前肢離地站立次數(shù)(持續(xù)≥1秒)。
靜止時間:無主動移動的累計時間(秒),。
應(yīng)激反應(yīng):抓取時掙扎強(qiáng)度(輕度/中度/劇烈),。
評分標(biāo)準(zhǔn)(參考改良的Murphy評分):
記錄與處理:
評分≥2分且持續(xù)48小時,,需考慮提前優(yōu)逝。
3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀察
觀察指標(biāo):
毛發(fā)蓬松度:正常(緊貼皮膚) vs. 蓬松(豎立如“炸毛”),。
光澤度:光滑有光澤 vs. 暗淡無光,。
脫毛區(qū)域:記錄脫毛部位(頭頸部、背部,、腹部)及面積(直徑cm),。
皮膚損傷:紅斑、結(jié)痂,、潰瘍等,。
分級記錄:
處理措施:
1級異常:加強(qiáng)墊料清潔,,補(bǔ)充維生素(如飲水中添加復(fù)合維生素B)。
2級異常:結(jié)合體重和活動度評估,,必要時終止實驗,。
3.3 注意事項
1. 減少應(yīng)激:
固定監(jiān)測人員,操作輕柔,,避免噪音干擾,。
稱重與行為學(xué)觀察在不同時間段進(jìn)行(如上午稱重,下午行為測試),。
2. 環(huán)境控制:
維持SPF級環(huán)境(溫度22-24℃,,濕度50-60%),避免環(huán)境波動影響數(shù)據(jù),。
3. 倫理閾值:
體重下降≥20%,、活動度評分≥2持續(xù)48小時或嚴(yán)重皮膚損傷,需立即啟動優(yōu)逝程序,。
3.4 常見問題與解決方案
通過系統(tǒng)監(jiān)測體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài),,可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài),,為實驗結(jié)果的可靠性及倫理合規(guī)性提供保障。
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