一,、簡要介紹

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素,，是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七氨基酸多肽毒素,，以較高的親和力和特異性結合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白）（Kd=20nM）,。

鬼筆環(huán)肽將肌動蛋白聚合的臨界濃度降至≤1μg/ml,，從而用作一種聚合增強劑。

熒光探針標記的鬼筆環(huán)肽（Fluorescent-conjugated Phalloidins）能對組織培養(yǎng)細胞,、組織切片和無細胞制備物進行肌動纖維絲染色,。

經(jīng)鬼筆環(huán)肽標記的肌動纖維絲仍能維持標記前的許多功能特征包括能夠與肌球蛋白相互作用,。

二、規(guī)格信息

【外觀】：紅色固體

【純度】：>95%

【分子量】：1775

【保存】：凍干粉4℃干燥保存半年,；儲存液-20℃避光保存半年,；

【重溶方法】：使用前簡單離心使得產(chǎn)品都降至管底，加入500µl 甲醇充分溶解后配置成14µM儲存液,。建議按照10×50µl分裝,，-20℃避光保存，穩(wěn)定保存6個月,。

【生產(chǎn)廠商】：西安強化生物科技

三,、使用說明

1. 免疫熒光（Immunofluorescence）

需要材料：

1）Actin-stainTM 555 Phalloidin（PHDH1）；

2）蓋玻片爬片生長達到半?yún)R合的Swiss 3T3細胞,；

3）PBS buffer,；

4）固定劑；

5）破膜劑,；

6）抗熒光淬滅封片劑,；

7）100nM DAPI in PBS；

8）載玻片,；

9）蓋玻片封固液（透明指甲油）,；

2. 制備穩(wěn)定的熒光標記肌動蛋白絲（Preparation of stabilized fluorescent actin filaments）

體外肌動蛋白運動試驗（in vitro motility assays），穩(wěn)定的熒光標記肌動蛋白絲是研究肌球馬達蛋白的底物材料,。Actin-stainTM 555 Phalloidin結合對肌球蛋白ATPase的肌動蛋白激活無影響,。

需要材料：

1）肌動蛋白Actin protein；

2）通用肌動蛋白緩沖液General Actin buffer,；

3）10×聚合緩沖液Polymerization buffer,；

4）Actin-stainTM 555 Phalloidin；

操作流程：

1) 用250ul 添加0.2mMATP和1.0mM DTT的通用肌動蛋白緩沖液來重懸兔肌肉肌動蛋白（rabbit muscle actin）,，使其濃度為1mg/ml,。

2) 加入1/10體積的聚合緩沖液來聚合肌動蛋白，室溫孵育1h,。

3) 用含70nM Actin-stainTM 555 phalloidin的聚合緩沖液按照1:100的比例稀釋聚合的肌動蛋白絲,。

4) 吸取1ul標記好的肌動蛋白滴在已滴有一滴抗熒光淬滅劑的載玻片上。

5) 取一干凈蓋玻片蓋在液滴處,，用紙巾吸掉多余液體,。

6) 熒光顯微鏡觀察熒光纖維。肌動蛋白絲平均長度為2-10um,，在4℃避光能穩(wěn)定保存1周,。

四、更多試劑

HumanLDL

HumanHDL

HumanOx-LDL

HumanAc-LDL

BODIPY 665/676

BODIPY 558/568 C12

Nigericin,Sodium Salt

Fluo-5N AM,Cell Permeant

Human High Density Lipoprotein

Human Dil-High Density Lipoprotein

CAY10731 (H2S Probe)硫化氫熒光探針

DL-Propargylglycine DL-炔丙基甘氨酸

Human Acetylated High Density Lipoprotein

Human VLDL (Human Very Low Density Lipoprotein)

原包裝應盡量選擇避光,，陰暗,，干燥的地方進行存放,，同時此試劑僅用于科研實驗。

綜合上述由西安強化生物科技有限公司的小編xxn整理完成,！