規(guī)格:

100mg，1 g,  1 ml

貯存條件:

避光,，-20度

CAS號:

PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)   CAS Number: 49553-93-7
MaxFect Transfection Regent       CAS Number: 49553-93-7       
 

物理性狀:

固體為白色或近白色粉末。 1 mg/mL水溶液透明,，接近無色或略顯黃色,。

用途:

細胞培養(yǎng)級別的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染。本產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于臨床治療,。

PEI MW25000和PEI Max MW40000區(qū)別：

PEI MAX MW40000 ( Polysciences#24765-1)是線性化聚乙烯亞胺PEI MW25000(Polysciences#23966-1)的升級產(chǎn)品,，是一種功能更為強大的高效瞬時轉(zhuǎn)染試劑。PEI MAX MW40000與PEI 25000的區(qū)別在于：
1）wanquan水解（去乙?；?/span>
2）PEI 25000的鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性
3）含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其轉(zhuǎn)染效率比PEI MW25000提高11%以上,。

4）PEI MAX 40K比PEI 25K更易于使用,，并且更高效。PEI 25K轉(zhuǎn)染溶液通常需要幾個小時才能制備,，而PEI MAX 40K可以在兩個小時內(nèi)轉(zhuǎn)化為即用型可溶性溶液,。
5）PEI 25K含有4-11%的殘余丙酰基,，可防止聚合物主鏈與DNA強烈結(jié)合,。PEI MAX 40K去乙酰化的結(jié)構(gòu)意味著每批產(chǎn)品的表現(xiàn)始終如一,，穩(wěn)定性更強,。

儲存濃度:

1 mg/ml

工作濃度:

3 ug/ml 左右，每ml培養(yǎng)基加入3 ul儲存液,。

PEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法：

1. 稱取100mg PEI轉(zhuǎn)染試劑,，溶解于100ml無菌水中。配置的終濃度是1 mg/ml.
2. 緩慢使用稀鹽酸,，調(diào)節(jié)PH至7.0,，一定不要讓pH過了，一旦過了效果就不好了,。
3. 使用0.1um或者0.22um無菌過濾器,，過濾除菌。
4. 分裝成每管500ul-1ml,，-20度,，保存，備用,。
5. 使用超純水配置,，器具一定要滅菌干凈，防止支原體污染,。
 

適用范圍:

本產(chǎn)品適用于絕大多數(shù)真核細胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染：HEK 293,，293T，A549,，B16F10,，HeLa，Hepa 1-6,，Hepa-1c1c7,，HepG2,，BHK-21，C2C12,，C6,，CHO-K1，COS-1,，COS-7,，Daoy，DU 145,，K562,，KB，LL/2(LLC1),， LNCaP-FGC,，MCF-7，MEL,，Neuro-2a,，NIH3T3，OVCAR-3,，PC-3,，PC-12等。

細胞培養(yǎng)基:

PEI轉(zhuǎn)染試劑適用于大多數(shù)常用細胞培養(yǎng)基,，且轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)基,，血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率。
 

轉(zhuǎn)染時細胞密度：

一般來說,，當細胞密度達到60% - 80%時進行轉(zhuǎn)染可以取得較高的轉(zhuǎn)染效率,。然而，不同細胞的最適轉(zhuǎn)染密度都不盡相同,。因此在初次轉(zhuǎn)染某種細胞時,，可以通過預實驗先確認該細胞最佳的轉(zhuǎn)染密度。

轉(zhuǎn)染質(zhì)粒純度和濃度：

用于細胞轉(zhuǎn)染的DNA應具有較高的純度,，且無內(nèi)毒素殘留(推薦使用無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑盒進行質(zhì)粒抽提),。質(zhì)粒濃度盡量高一些，建議大于500 ng/ul.

轉(zhuǎn)染比例：

DNA：PEI = 1:3
1ml細胞培養(yǎng)液,，建議使用1 ug-3 ug DNA 和3 ul - 9 ul PEI轉(zhuǎn)染試劑儲存液,。具體根據(jù)細胞情況自由調(diào)整。

在初次轉(zhuǎn)染某種細胞時,，推薦PEI和DNA的比例為2:1,，即1 μg DNA使用2 μl PEI。轉(zhuǎn)染1 μg DNA所使用的PEI轉(zhuǎn)染試劑劑量可以在1 - 5 μl之間進行調(diào)整以獲得最佳的轉(zhuǎn)染效率,。
 

轉(zhuǎn)染后細胞培養(yǎng)時間:

對于絕大多數(shù)細胞實驗而言培養(yǎng)24 - 48 h即可,，如實驗情況特殊可在12 - 72 h之間進行優(yōu)化。