樣品RNA的制備

來源：優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司 2025年04月09日 10:41

黃頭病毒(Yellow Head Virus,YHV)是一種RNA病毒,，黃頭病是對蝦的主要病害之一，病毒感染的靶器官為蝦的鰓,、觸角腺,、造血組織、淋巴器官等,。病蝦發(fā)病初期攝食量增加,，然后突然停止吃食，在2~4天內(nèi)會出現(xiàn)臨床現(xiàn)象并死亡,。許多瀕臨死亡的蝦聚集在池塘角落的水面附近,，其頭胸甲因里面的干胰腺發(fā)黃而變成黃色，對蝦體色發(fā)白,，鰓棕色或白色,，瀕臨死亡的蝦其外胚層和中胚層發(fā)源的器官會出現(xiàn)全身性的壞死，已納入世界衛(wèi)生組織規(guī)定之檢疫傳染病之一,，因此快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用,。本產(chǎn)品基于PCR原理開發(fā)。它具有下列特點(diǎn)：

1.一站式,，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,，包括引物和對照。

2.根據(jù)黃頭病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物,，具有良好的特異性,。

3.基于染料法qRT-PCR檢測，靈敏度比常規(guī)RT-PCR高10-100倍,，可以達(dá)到至少1000拷貝/反應(yīng),。

4.使用一管式qRT-PCR技術(shù)，RT和PCR兩步在一個試管內(nèi)完成,，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品,，降低了操作誤差和可能的污染。

5.本產(chǎn)品足夠50次30μL體系的RT-PCR,，只能用于科研,，不能用于臨床。

樣品RNA的制備：

如果有N個樣品,，必須設(shè)置N+2個提取,，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?0μL上步制備的陽性對照梯度稀釋液中的第4號（濃度為1×10E4拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣,，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）,?？梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫φ铡?/div>

用自選方法純化N+2個樣品的RNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容,。

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