手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
白喉棒狀桿菌毒素ELISA檢測試劑盒通常采用雙抗原夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）,，具體操作步驟如下：
一,、檢測原理
通過預先包被白喉棒狀桿菌抗原的微孔板,，依次加入待測樣本,、辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體，經溫育后徹底洗滌,，加入底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶催化下轉化為藍色，最終在酸作用下變?yōu)辄S色,，通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值比較，判定樣本中白喉棒狀桿菌毒素抗體的存在,。
二、操作步驟
樣本準備
血清/血漿：收集后3000轉離心10分鐘分離血清或血漿,，避免溶血和高脂樣本,。
保存條件：若不立即檢測，樣本需分裝后凍存于-20℃,，避免反復凍融,，室溫解凍并充分混勻。
試劑準備
試劑盒平衡：試劑盒于2-8℃保存,，使用前室溫平衡20分鐘,。
洗滌液稀釋：濃縮洗滌液用蒸餾水按1:20或1:50稀釋（根據試劑盒說明）。
加樣與溫育
設置對照孔：陰,、陽性對照孔各加入50μL對照液,。
樣本孔：加入50μL稀釋后的樣本。
加入檢測抗體：每孔加入100μLHRP標記的檢測抗體,，封板膜封住反應孔,，37℃水浴或恒溫箱溫育60分鐘。
洗滌
棄去液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置1分鐘后甩去，重復5次（或用洗板機洗滌）,。
顯色與終止
每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15分鐘。
每孔加入50μL終止液,，15分鐘內于450nm波長測定OD值,。
三、結果判斷
試驗有效性
陽性對照孔OD值平均值≥1.00,，陰性對照孔OD值平均值≤0.15,。
臨界值計算
臨界值（Cutoff）=陰性對照孔平均值+0.15。
結果判定
陰性：樣本OD值<臨界值,。
陽性：樣本OD值>臨界值,。
四、注意事項
操作規(guī)范
實驗中不用的板條應立即放回自封袋密封保存,。
所有液體組分使用前需充分搖勻,，避免產生氣泡。
安全防護
避免直接接觸終止液和底物A,、B,，若接觸需立即用水沖洗。
實驗中禁止吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
儀器與設備
需配備450nm酶標儀、高精度加樣器及槍頭,、37℃恒溫箱,。
試劑保存
試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗,。
試劑盒需2-8℃避光防潮保存,，嚴格按照說明書操作。
五,、試劑盒優(yōu)勢
高敏感性與特異性：歐盟CE認證,，不與其他可溶性結構類似物交叉反應。
操作簡便：即用型試劑,，適用于手動或自動化檢測系統(tǒng),。
臨界值質控：提供質控品，確保檢測結果準確可靠,。
六,、應用領域
疾控中心、科研實驗室,、醫(yī)院等機構用于白喉棒狀桿菌毒素抗體的檢測,，輔助白喉疾病的診斷與流行病學調查。
通過上述方法,，可高效,、準確地檢測樣本中白喉棒狀桿菌毒素抗體的存在,，為白喉的防控提供科學依據
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,，未經本網授權不得轉載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,，應在授權范圍內使用,，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者,，本網將追究其相關法律責任,。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體,、網站或個人從本網轉載時,，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任,。
- 如涉及作品內容,、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯系,，否則視為放棄相關權利,。
采購中心