ATP生物熒光檢測儀的工作原理是基于螢火蟲發(fā)光的生物化學(xué)反應(yīng),，具體過程如下：

　　熒光素-熒光素酶反應(yīng)體系：ATP生物熒光檢測儀利用了熒光素-熒光素酶這一生物發(fā)光體系。熒光素是一種在生物體內(nèi)能發(fā)光的物質(zhì),，而熒光素酶是一種可以催化熒光素發(fā)光反應(yīng)的酶,。在有氧條件下，熒光素酶能夠催化熒光素與ATP發(fā)生反應(yīng),。

　　能量轉(zhuǎn)移與發(fā)光：當(dāng)熒光素與ATP結(jié)合后，會發(fā)生一系列的化學(xué)反應(yīng),，形成一種激活態(tài)的熒光素-酶-底物復(fù)合物,。在復(fù)合物回到基態(tài)的過程中，會釋放出能量,，這種能量以光子的形式釋放,，從而產(chǎn)生熒光。

　　檢測與量化：ATP生物熒光檢測儀內(nèi)部配備有高靈敏度的光電檢測裝置,，如光電倍增管或電荷耦合器件（CCD）,。這些裝置能夠捕捉到熒光素發(fā)光產(chǎn)生的微弱熒光信號，并將其轉(zhuǎn)化為電信號進(jìn)行放大和處理,。儀器通過對熒光信號的強(qiáng)度進(jìn)行測量和分析,，進(jìn)而計(jì)算出樣品中ATP的含量,。由于ATP是所有活細(xì)胞中都含有的一種能量物質(zhì)，其含量與細(xì)胞數(shù)量在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān),，所以通過檢測ATP含量就可以間接反映出樣品中的微生物數(shù)量或生物殘留量,。