聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）原理是生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng),。PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會變成單鏈,，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右）,，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈,。

        PCR反應(yīng)條件的選擇技巧主要體現(xiàn)在溫度、時(shí)間和循環(huán)次數(shù)上,，溫度過高,，延伸時(shí)間不夠都會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大的影響，以下總結(jié)方法技巧,。

　　溫度與時(shí)間的設(shè)置： 基于PCR原理三步驟而設(shè)置變性-退火-延伸三個(gè)溫度點(diǎn),。在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)中采用三溫度點(diǎn)法，雙鏈DNA在90～95℃變性,，再迅速冷卻至40 ～60℃,，引物退火并結(jié)合到靶序列上，然后快速升溫至70～75℃,，在Taq DNA 聚合酶的作用下,，使引物鏈沿模板延伸,。對于較短靶基因(長度為100～300bp時(shí))可采用二溫度點(diǎn)法，除變性溫度外,、退火與延伸溫度可合二為一,，一般采用94℃變性，65℃左右退火與延伸(此溫度Taq DNA酶仍有較高的催化活性),。