做Western Blot雜帶多,？免疫熒光背景像星空,？ELISA檢測總翻車,？

別急著懷疑自己的手,！可能是你的抗體沒選對,！

今天手把手教你避坑,，輕松get靠譜抗體選擇技巧！

?【選抗體必看3步法】

??Step 1：明確靶標

?? 了解待測靶標：在uniprot查詢待測蛋白信息,，包括名稱,、分子量、陽性組織/細胞種類,、亞細胞定位等,。

??實驗應(yīng)用目的：研究靶蛋白細胞定位可選IHC/IF；研究靶蛋白是表達或定量可選WB,，ELISA,。

??實驗樣本：明確實驗樣本，選擇合適的陽性對照,。

??Step 2：了解抗體信息

?? 抗體名稱（Antibody name）: 含靶蛋白名稱,，磷酸化抗體含磷酸化位點；

??抗體貨號（Catalog number）: 抗體獨*無*標記,，相同貨號抗體也會有不同批次號,，如需重復(fù)實驗的，選同一批號抗體,。

??宿主（Host）: 抗體來源物種,，常見有Rabbit, Mouse, Human,等，避免選擇與樣本物種相同來源的抗體,，防止同源高背景,。

??克隆類型（Clonality）: 多克隆（Polyclonal）多抗原表位,，親和性高,，有利信號放大，適用表達水平低和抗原微小修飾的檢測,；單克隆(Monoclonal)單一抗原表位，特異性高，批次一致性高,，適用要求高特異性和重復(fù)實驗的研發(fā),。

??檢測應(yīng)用 （Tested applications）: 抗體檢測過的實驗類型比如WB, IHC，ELISA等,，根據(jù)實驗需要選擇,。

??反應(yīng)物種（Reactivity）: 抗體檢測過的物種，確保里面包含待測樣本的物種,。

??免疫原（Immunogen）: 包含多肽和重組蛋白,，多肽片段短，獲得的抗體特異性一般沒有重組蛋白作為免疫原的高,，比較抗體免疫原的Uniprot ID信息,，是否是你要測的目的蛋白。

??抗體檢測結(jié)果圖：非常重要,，根據(jù)抗體檢測結(jié)果可以分辨抗體的特異性和物種適應(yīng)性,，有些抗體還提供敲除/敲低樣本驗證圖，多物種交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)的更優(yōu),。

??其他考慮因素：抗體價格或貨期,，售后服務(wù)有保障。

??Step 3：小樣測試

??購買小規(guī)格進行小樣測試,；

??建議先跑陽性對照,，摸索**抗體稀釋比例。