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【科研人必看】如何找到適合你實驗的抗體

來源:武漢博歐特生物科技有限公司   2025年04月01日 15:05  

做Western Blot雜帶多?免疫熒光背景像星空,?ELISA檢測總翻車,?

別急著懷疑自己的手!可能是你的抗體沒選對,!

今天手把手教你避坑,,輕松get靠譜抗體選擇技巧,!

?【選抗體必看3步法】

??Step 1:明確靶標(biāo)

?? 了解待測靶標(biāo):在uniprot查詢待測蛋白信息,包括名稱,、分子量,、陽性組織/細胞種類、亞細胞定位等,。

??實驗應(yīng)用目的:研究靶蛋白細胞定位可選IHC/IF,;研究靶蛋白是表達或定量可選WB,ELISA,。

??實驗樣本:明確實驗樣本,,選擇合適的陽性對照。

??Step 2:了解抗體信息

?? 抗體名稱(Antibody name): 含靶蛋白名稱,,磷酸化抗體含磷酸化位點,;

??抗體貨號(Catalog number): 抗體獨*無*標(biāo)記,相同貨號抗體也會有不同批次號,,如需重復(fù)實驗的,,選同一批號抗體。

??宿主(Host): 抗體來源物種,,常見有Rabbit, Mouse, Human,等,,避免選擇與樣本物種相同來源的抗體,防止同源高背景,。

??克隆類型(Clonality): 多克?。≒olyclonal)多抗原表位,親和性高,,有利信號放大,,適用表達水平低和抗原微小修飾的檢測;單克隆(Monoclonal)單一抗原表位,,特異性高,,批次一致性高,適用要求高特異性和重復(fù)實驗的研發(fā),。

??檢測應(yīng)用 (Tested applications): 抗體檢測過的實驗類型比如WB, IHC,,ELISA等,根據(jù)實驗需要選擇,。

??反應(yīng)物種(Reactivity): 抗體檢測過的物種,,確保里面包含待測樣本的物種。

??免疫原(Immunogen): 包含多肽和重組蛋白,,多肽片段短,,獲得的抗體特異性一般沒有重組蛋白作為免疫原的高,比較抗體免疫原的Uniprot ID信息,是否是你要測的目的蛋白,。

??抗體檢測結(jié)果圖:非常重要,,根據(jù)抗體檢測結(jié)果可以分辨抗體的特異性和物種適應(yīng)性,有些抗體還提供敲除/敲低樣本驗證圖,,多物種交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)的更優(yōu),。

??其他考慮因素:抗體價格或貨期,售后服務(wù)有保障,。

??Step 3:小樣測試

??購買小規(guī)格進行小樣測試,;

??建議先跑陽性對照,摸索**抗體稀釋比例,。


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