在分子生物學(xué)研究中,,精準(zhǔn)檢測(cè)大腸桿菌(E.coli)殘留RNA時(shí),,樣本中混雜的DNA可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。針對(duì)這一需求,,由柏萊源(天津)生物科技有限公司代理的譜新生物Hillgene推出的E.coli殘留總RNA樣本前處理試劑盒(Cat. No. HG-CL300),,通過高效去除DNA污染,為后續(xù)RNA檢測(cè)提供純凈樣本,。本文將詳細(xì)介紹其原理,、操作步驟及核心優(yōu)勢(shì),助力科研人員提升實(shí)驗(yàn)效率,。
一,、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:為何需要去除E.coli殘留DNA?
在基因表達(dá)分析,、RNA測(cè)序或病原體檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)中,,殘留的宿主DNA可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果或數(shù)據(jù)偏差,。本試劑盒專為去除E.coli樣本中的DNA污染設(shè)計(jì),通過DNase I酶切技術(shù),,結(jié)合RNase Inhibitor保護(hù)RNA完整性,,確保檢測(cè)結(jié)果高度可靠。
適用場(chǎng)景:配套E.coli殘留總RNA檢測(cè)試劑盒(HG-ER001),,適用于藥物研發(fā),、細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)控等科研領(lǐng)域。
核心優(yōu)勢(shì):
高效去DNA:DNase I快速消化DNA,,37℃孵育60分鐘即可完成,。
RNA保護(hù):添加RNase Inhibitor,防止RNA降解,。
操作簡(jiǎn)便:預(yù)混反應(yīng)體系,,20分鐘完成滅活與保存。
二,、試劑盒組成與儲(chǔ)存條件
每盒包含100次反應(yīng)所需組分(詳見表1):
組分 | 體積 | 存儲(chǔ)條件 |
---|---|---|
10X Reaction Buffer | 220μL | -20℃ |
DNase I | 110μL | -20℃ |
RNase Inhibitor | 55μL | -20℃ |
無酶水 | 2×1mL | -20℃ |
有效期:-20℃保存可達(dá)18個(gè)月,,避免反復(fù)凍融。
三,、實(shí)驗(yàn)步驟詳解(附操作流程圖)
1. 反應(yīng)體系配置
按表2配制20μL反應(yīng)液:
組分 | 用量(μL) |
---|---|
DNase I | 1 |
10X Reaction Buffer with MgCl2 | 2 |
RNase Inhibitor | 0.5 |
無酶去離子水 | 12.5 |
供試品 | 4 |
2. 酶切與滅活流程
步驟1:混勻反應(yīng)液,,離心后37℃孵育60分鐘。
步驟2:65℃加熱10分鐘滅活DNase I,,2-8℃暫存樣本,。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
分區(qū)操作:陽(yáng)性與陰性樣本需在不同區(qū)域處理,,避免交叉污染,。
低溫操作:試劑融化后置于冰上使用,確保酶活性,。
耗材更換:每一步驟更換吸頭,,減少氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)。
配套使用:建議搭配原廠檢測(cè)試劑盒(HG-ER001)以保證最佳效果,。
五,、常見問題解答(FAQ)
Q1:能否用于臨床診斷?
本試劑盒僅限科研用途,,不適用于臨床檢測(cè),。
Q2:DNase I滅活不徹i底怎么辦?
嚴(yán)格按65℃加熱10分鐘操作,,瞬時(shí)離心確保徹i底滅活,。
Q3:樣本處理后的保存時(shí)間?
滅活后樣本建議2-8℃保存不超過24小時(shí),避免RNA降解,。
六,、為何選擇Hillgene?
高穩(wěn)定性:通過凍融循環(huán)驗(yàn)證,,無需分裝,。
專業(yè)支持:提供技術(shù)咨詢與定制化解決方案。
嚴(yán)控質(zhì)控:每批次試劑均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)檢,,確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性,。
七、結(jié)語(yǔ)
E.coli殘留總RNA樣本前處理試劑盒(HG-CL300)憑借其高效去DNA能力與操作便捷性,,已成為分子生物學(xué)研究的優(yōu)選工具,。無論是基因治療產(chǎn)品開發(fā),還是病原體RNA檢測(cè),,均能顯著提升實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)度,。立即聯(lián)系柏萊源生物獲取更多產(chǎn)品信息!
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現(xiàn)貨供應(yīng):公司庫(kù)存充足,可快速發(fā)貨,,減少用戶等待時(shí)間,。
效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,。
專業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),,幫助用戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,,提高實(shí)驗(yàn)成功率。
定制化服務(wù):根據(jù)用戶需求,,提供個(gè)性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案,。
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