E.coli殘留DNA檢測試劑盒:高靈敏度助力生物制品質(zhì)量控制
產(chǎn)品概述
E.coli殘留DNA檢測試劑盒(qPCR-熒光探針法)是一款基于Taqman探針技術(shù)的科研級(jí)檢測工具,專為精準(zhǔn)定量生物制品(如疫苗,、基因治療藥物)中的大腸桿菌宿主細(xì)胞DNA殘留而設(shè)計(jì),。該試劑盒結(jié)合高靈敏度熒光定量PCR技術(shù),檢測限低至3×101fg/μL,,支持從中間品到成品的全流程質(zhì)量控制,,為生物制藥行業(yè)提供高效、可靠的檢測方案,。
核心優(yōu)勢
- 超高靈敏度:檢測范圍覆蓋3×10?fg/μL至3×10?fg/μL,,最i低檢測限達(dá)fg級(jí),滿足嚴(yán)苛質(zhì)控需求,。
- 國家標(biāo)準(zhǔn)品配套:采用國家標(biāo)準(zhǔn)的E.coli DNA定量參考品,,確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性與可溯源性。
- 廣泛儀器兼容性:適配ABI7500,、BioRad CFX96,、Roche LightCycler 480等主流qPCR儀器(需根據(jù)機(jī)型選擇ROX參比染料)。
- 操作便捷:即用型試劑設(shè)計(jì),,配合前處理試劑盒(貨號(hào)HG-CL100),,簡化實(shí)驗(yàn)流程。
應(yīng)用場景
- 生物制藥生產(chǎn):監(jiān)測重組蛋白,、抗體藥物中宿主DNA殘留,,確保成品安全性。
- 基因治療研發(fā):評(píng)估病毒載體或基因編輯產(chǎn)品的純度。
- 科研實(shí)驗(yàn):用于微生物學(xué),、分子生物學(xué)研究中的DNA定量分析,。
技術(shù)原理與操作流程
檢測原理(采用Taqman探針法):
1. 探針標(biāo)記:熒光探針與目標(biāo)DNA特異性結(jié)合,PCR擴(kuò)增時(shí)探針?biāo)忉尫艧晒庑盘?hào),。
2. 實(shí)時(shí)定量:通過熒光強(qiáng)度變化(FAM通道)實(shí)時(shí)監(jiān)測DNA擴(kuò)增,,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算殘留量,。
操作流程
1. 樣品前處理:使用配套試劑盒(HG-CL100)提取純化DNA,。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:按梯度稀釋國家參考品(ST0-ST5),制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
標(biāo)準(zhǔn)品代號(hào) | 稀釋體積 | 濃度(fg/μL) |
ST0 | 10μL E.coli DNA 定量參考品 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×106 |
ST1 | 10μL ST0 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×105 |
ST2 | 10μL ST1 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×104 |
ST3 | 10μL ST2 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×103 |
ST4 | 10μL ST3 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×102 |
ST5 | 10μL ST4 + 90μL DNA 稀釋液 | 3 ×101 |
3. 反應(yīng)體系配置:混合2×qPCR緩沖液,、引物探針Mix及適配ROX,加入待測樣本,。
4. qPCR程序運(yùn)行:
- 預(yù)變性:95℃ 10分鐘
- 40次循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 60秒(熒光采集)
5. 數(shù)據(jù)分析:通過Ct值計(jì)算樣本濃度,,驗(yàn)證標(biāo)曲線性(R2>0.98)與加標(biāo)回收率(50%-150%)。
常見問題解答(Q&A)
Q:陰性對(duì)照(NTC/NCS)出現(xiàn)信號(hào)怎么辦,?
A:可能是交叉污染或試劑失效,,建議更換吸頭、分區(qū)操作,,并檢查試劑有效期,。
Q:標(biāo)曲擴(kuò)增效率不達(dá)標(biāo)如何處理?
A:優(yōu)化引物探針濃度,,確保標(biāo)準(zhǔn)品稀釋準(zhǔn)確,,避免反復(fù)凍融。
Q:如何選擇ROX參比染料,?
A:參照說明書中的機(jī)型適配表,,或聯(lián)系技術(shù)支持獲取定制建議。
儲(chǔ)存與有效期
- 未開封試劑盒:-20℃保存,,有效期18個(gè)月,。
- 開封后:避免反復(fù)凍融,ROX染料需嚴(yán)格避光,。
關(guān)于我們
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效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,,確保試劑效期新鮮,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,。
專業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),,幫助用戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)成功率,。
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