細胞培養(yǎng)過程中為什么會產(chǎn)生小黑點？

1,、生產(chǎn)工藝 在細胞培養(yǎng)過程中加入胎牛血清出現(xiàn)了小黑點,，并且隨著培養(yǎng)過程小黑點越來越多，這與胎牛血清的生產(chǎn)工藝有很大關(guān)系,。目前胎牛血清的生產(chǎn)主要有兩種工藝：① 自然凝聚生產(chǎn)獲得血清,，該生產(chǎn)控制要求嚴格，自然凝集的胎牛血幾乎不會出現(xiàn)小黑點,。② 離心生產(chǎn)血清,，該工藝可能會導(dǎo)致小黑點的產(chǎn)生。

2,、細胞老化在細胞的表面出現(xiàn)小黑點,，表明細胞老化，在細胞間隙間出現(xiàn)的小黑點,，說明細胞營養(yǎng)不足導(dǎo)致細胞碎片化,，需要更換細胞或者更換等級更高的血清。

3,、實驗污染細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的小黑點也有可能是因為出現(xiàn)了污染,。當有小黑點形成后判斷是細胞污染還是細胞碎片，首先通過在鏡下觀察小黑點運動狀態(tài),，很多會動的小黑點只是發(fā)生布朗運動的細胞碎片,，而細菌在運動上則較為活躍和浮躁。然后判斷培養(yǎng)基的渾濁程度,，如果細胞被污染,，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁,。

如何避免胎牛沉淀出現(xiàn)及培養(yǎng)基中小黑點的生成？

采用正確的解凍方法1,、2℃~8℃解凍,；2、解凍的過程中間斷搖勻（隔一段時間輕柔搖勻）,；3,、室溫或者水浴溶解均易造成沉淀增多。

正確使用和保存

1,、非必須不用熱滅活（熱滅活會使血清中部分蛋白質(zhì)變性析出,，影響血清品質(zhì)）；2,、不宜37℃預(yù)熱,，血清和培養(yǎng)基通常室溫預(yù)熱即可,；3、避免反復(fù)凍融,；4,、避免紫外線照射；5,、避免2-8℃長期保存,，分裝后-