日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您,? 在線咨詢

賽默飛熒光定量PCR儀注意事項(xiàng)

來(lái)源:杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司   2025年03月18日 20:53  

賽默飛熒光定量PCR儀(如QuantStudio系列)**時(shí)應(yīng)注意的關(guān)鍵事項(xiàng),,涵蓋設(shè)備使用、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備,、數(shù)據(jù)分析,、安全等方面:


一,、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段

  1. 樣本與試劑準(zhǔn)備

    • 樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,保持RNA/DNA質(zhì)量,。

    • 所有試劑應(yīng)解凍并混勻后再使用,。

    • 使用低吸附管或PCR專用耗材,減少吸附損失,。

  2. 反應(yīng)體系設(shè)置

    • 嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)配制體系,,注意引物、探針濃度,。

    • 使用去RNA酶/去DNA酶的無(wú)核酸水配制,。

    • 配置時(shí)操作應(yīng)在冰上進(jìn)行,避免酶活性變化,。

  3. 加樣操作

    • 避免氣泡,,影響熒光讀數(shù)。

    • 封板前輕輕離心,,確保液體在孔底,。

    • 使用光學(xué)封板膜,確保貼合緊密,、無(wú)褶皺,。


二、儀器操作階段

  1. PCR板放置

    • 保持板底清潔,,避免灰塵,、水漬影響檢測(cè)。

    • 板放入儀器前注意方向正確,,與軟件板圖一致,。

  2. 通道設(shè)定

    • 選擇與試劑染料匹配的熒光通道。

    • 若為多重檢測(cè),,確保熒光染料無(wú)通道重疊,。

  3. 擴(kuò)增程序設(shè)置

    • 根據(jù)反應(yīng)體系設(shè)定溫度和循環(huán)參數(shù)。

    • 通常熒光采集設(shè)在延伸階段,。

  4. 熔解曲線(如SYBR Green)

    • 啟用熔解曲線分析可判斷擴(kuò)增特異性,。

    • 單一峰形代表反應(yīng)特異性良好,。


三、數(shù)據(jù)分析階段

  1. Ct值判斷

    • Ct值過(guò)高(>35)應(yīng)考慮模板濃度,、污染或反應(yīng)效率問(wèn)題,。

    • 無(wú)模板對(duì)照應(yīng)無(wú)擴(kuò)增曲線,否則懷疑污染,。

  2. 擴(kuò)增曲線觀察

    • 正常擴(kuò)增曲線呈“S”型,。

    • 曲線不規(guī)則或漂移可能因加樣誤差或設(shè)備問(wèn)題。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(絕對(duì)定量)

    • R2值應(yīng)接近1,,擴(kuò)增效率在90–110%之間較理想,。


四、安全與維護(hù)

  1. 設(shè)備清潔

    • 加熱模塊表面需定期擦拭,。

    • 避免液體流入樣本槽,,若有泄漏立即處理。

  2. 避免交叉污染

    • 區(qū)分模板制備區(qū)與擴(kuò)增區(qū),。

    • 使用過(guò)濾吸頭,,勤更換手套。

  3. 試劑儲(chǔ)存

    • 酶類試劑儲(chǔ)存于-20℃,,避免頻繁凍融,。

    • 染料類避光保存,使用后立即蓋緊,。

  4. 數(shù)據(jù)備份

    • 定期導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),,避免軟件崩潰造成丟失。

    • 軟件升級(jí)前應(yīng)先備份方法與結(jié)果文件,。


免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。
企業(yè)未開(kāi)通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618