1. 引言
超微量分光光度計(Nano spectrophotometer)是一種基于紫外-可見光(UV-Vis)分光光度法的高精度檢測儀器,,廣泛用于生物醫(yī)學(xué),、環(huán)境分析和材料科學(xué)等領(lǐng)域。其主要優(yōu)勢在于可測量極微量樣品(0.5–2 µL),,無需比色皿,大大降低了樣品損耗,。本文將詳細(xì)介紹其工作原理及應(yīng)用,。
2. 工作原理
2.1 光源與光譜測量
超微量分光光度計通常采用氙燈或LED作為光源,覆蓋200–900 nm的波長范圍,。光束穿過待測樣品后,,未被吸收的部分由檢測器(如光電二極管或CCD陣列)接收,以計算樣品的吸光度,。
2.2 比爾-朗伯定律
光吸收特性遵循比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law):
其中:
為吸光度
為摩爾消光系數(shù)(與物質(zhì)特性相關(guān))
為溶液濃度(mol/L)
為光程長度(cm)
超微量分光光度計通常采用固定光程(如0.5 mm 或 1 mm),,可直接計算樣品濃度,無需額外稀釋,。
2.3 樣品檢測方式
與傳統(tǒng)分光光度計不同,,超微量分光光度計采用納米樣品平臺(NanoDrop技術(shù)),,通過表面張力固定微量液滴(如1 µL),無需比色皿,,從而減少樣品浪費(fèi),。
3. 主要應(yīng)用
3.1 核酸檢測
DNA/RNA濃度測定:通過測量260 nm波長的吸光度(A260)計算核酸濃度。
純度評估:常用A260/A280比值(≈ 1.8 表示純DNA,,≈ 2.0 表示純RNA)判斷蛋白質(zhì)污染,。
3.2 蛋白質(zhì)分析
通過280 nm波長測定蛋白質(zhì)吸光度(A280)。
利用布拉德福德法(Bradford Assay)或雙縮脲法(BCA Assay)進(jìn)行定量分析,。
3.3 其他應(yīng)用
細(xì)胞培養(yǎng)液的濃度測定
納米材料溶液的光學(xué)特性分析
環(huán)境樣品(如水污染物)的檢測
4. 結(jié)論
超微量分光光度計以其高靈敏度,、低樣品需求和便捷操作的特點(diǎn),在生命科學(xué)和材料研究領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用,。隨著技術(shù)的發(fā)展,,其檢測精度和自動化水平將進(jìn)一步提高,為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供更加高效的分析工具,。
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