日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您,? 在線咨詢

蛋白定量BCA法檢測實(shí)驗(yàn)干貨分享

來源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司   2025年03月17日 16:25  

       BCA(Bicinchoninic Acid)法是一種常用的蛋白定量檢測方法,,其原理是利用蛋白質(zhì)與銅離子在堿性溶液中發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),生成穩(wěn)定的紫紅色復(fù)合物,,再與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,,即可求出待測蛋白的濃度,。該方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高,、操作簡便,、抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)等領(lǐng)域,。

實(shí)驗(yàn)步驟:

1.試劑準(zhǔn)備

(1)BCA工作液:將BCA試劑A和B按50:1的比例混合,,充分搖勻,備用,。

(2)標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液:取適量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白,,用PBS或去離子水溶解,,配制成濃度為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

2.蛋白樣品制備

(1)細(xì)胞裂解:將細(xì)胞樣品離心,,去除上清液,,加入適量的細(xì)胞裂解液,在冰上裂解30min,,使細(xì)胞充分裂解,。

(2)去除雜質(zhì):將裂解后的樣品離心,去除沉淀,,保留上清液,。在上清液中加入適量的SDS,使終濃度為0.1%,,充分混勻,。

(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:取適量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,加入適量的SDS,,使終濃度為0.1%,,然后分別稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。取96孔板,,分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,每個濃度設(shè)3個復(fù)孔,。在每個孔中加入BCA工作液,,充分混勻。然后按照說明書要求,,在特定波長下測量吸光度值,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.蛋白定量檢測

(1)取適量的待測蛋白樣品,,加入適量的SDS,,使終濃度為0.1%,充分混勻,。然后按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法,,加入BCA工作液,測量吸光度值,。

(2)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,,查找出待測蛋白樣品的濃度。如果待測蛋白樣品濃度較高,,可以進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,。

注意事項:

1.BCA工作液應(yīng)儲存于4℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。

2.實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)保持樣品和標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液的pH值一致,,以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

3.在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)避免交叉污染,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。

4.對于一些特殊的蛋白質(zhì)樣品,,可能需要采用其他方法進(jìn)行定量檢測。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618