FITC-OVA:熒光標(biāo)記卵清蛋白的合成、應(yīng)用及生物學(xué)意義
1. 引言
卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)作為一種模型蛋白,具有免疫原性低,、生物相容性高的特點(diǎn)。通過(guò)FITC標(biāo)記OVA(FITC-OVA),,可賦予其綠色熒光特性,,便于研究蛋白的細(xì)胞攝取、組織分布及免疫應(yīng)答機(jī)制,。
2. FITC-OVA的合成與表征
2.1 合成原理
FITC通過(guò)其異硫氰酸基團(tuán)與OVA的賴氨酸殘基(ε-氨基)發(fā)生親核取代反應(yīng),,形成穩(wěn)定的硫脲鍵。標(biāo)記效率(FL/Protein)可通過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度法(UV-Vis)測(cè)定,,優(yōu)化pH(8.5-9.5)和反應(yīng)時(shí)間(2-4 h)以提高產(chǎn)率,。
2.2 理化特性
· 熒光穩(wěn)定性:FITC-OVA在生理?xiàng)l件下(37℃, pH 7.4)保持強(qiáng)熒光,半衰期超過(guò)72 h,。
· 生物活性:標(biāo)記后OVA的抗原性保留率超過(guò)90%,,適合免疫學(xué)研究。
3. 應(yīng)用領(lǐng)域
3.1 疫苗遞送系統(tǒng)
FITC-OVA作為模型抗原,,可研究納米粒(如PLGA微球)的佐劑效應(yīng)及淋巴靶向性,。例如,F(xiàn)ITC-OVA負(fù)載的殼聚糖納米??娠@著增強(qiáng)樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的攝取效率,。
3.2 細(xì)胞成像與示蹤
通過(guò)共聚焦顯微鏡觀察FITC-OVA在腫瘤細(xì)胞(如HeLa)中的內(nèi)吞路徑,揭示網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞機(jī)制,。
3.3 過(guò)敏反應(yīng)研究
利用FITC-OVA激發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒,,實(shí)時(shí)追蹤組胺釋放過(guò)程,為過(guò)敏性疾病機(jī)制研究提供可視化工具,。
4. 挑戰(zhàn)與優(yōu)化方向
FITC-OVA的熒光可能因蛋白聚集導(dǎo)致淬滅,,未來(lái)可通過(guò)引入PEG間隔臂或替換為近紅外染料(如Cy5)改善性能。
供應(yīng)商:重慶渝偲醫(yī)藥科技有限公司
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。