細(xì)胞名稱:NCI-H2228 人肺癌細(xì)胞

貨號：WS60239（STR鑒定）

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞介紹

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,，患者不吸煙。細(xì)胞生長速度慢,，傳代一次時間為10-15天,。每個批次均通過本庫支原體檢測，結(jié)果為陰性,。在我?guī)焱ㄟ^STR檢測無誤,。

STR鑒定結(jié)果為：Amelogenin: X; CSF1PO: 12; D13S317: 11; D16S539: 11,13; D5S818: 12; D7S820: 11; THO1: 7,8; TPOX: 11; vWA: 15,17。

一,、細(xì)胞特性

1） 來源：人 肺

2） 形態(tài)：上皮樣,，貼壁細(xì)胞

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二,、運輸和保存 

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系,。 

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 

三,、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 

STR鑒定結(jié)果：

Amelogenim：X  Y

D5S818：9,，11

D13S317：8,11

D7S820：8，12

D16S539：9,，13

vWA：15,，17

THO1：9.3，13

TPOX：8,，18

CSF1PO：12,，13

H1細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞

1.試劑和材料

H1細(xì)胞培養(yǎng)基試劑盒

四、傳代方法

收到細(xì)胞后,，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況,。

（一)如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液,，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。

(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，用力拍打瓶壁,，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細(xì)胞脫落后,，加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半,，分到新的培養(yǎng)瓶中,。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二,。

注：

1,、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

2,、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4,、收到細(xì)胞后,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請及時與我們聯(lián)系,。