571186-05-5,BODIPY TR-Ceramide的使用方法
BODIPY TR-Ceramide 是一種熒光標(biāo)記的鞘氨醇(ceramide)類似物,結(jié)合了 BODIPY TR(一種遠(yuǎn)紅光熒光染料)和 ceramide(鞘氨醇)的特性。它廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中,尤其是在研究細(xì)胞膜的動(dòng)態(tài)變化、脂質(zhì)代謝和細(xì)胞凋亡等方面,。
BODIPY TR 是一種遠(yuǎn)紅光熒光染料,其發(fā)射波長(zhǎng)通常在630-650 nm范圍內(nèi),。
這種染料具有高熒光量子產(chǎn)率,、良好的光穩(wěn)定性和低背景熒光,適合用于活細(xì)胞成像,。
它的熒光信號(hào)可以通過(guò)遠(yuǎn)紅光激發(fā),,減少細(xì)胞內(nèi)其他熒光物質(zhì)的干擾。
Ceramide 是一種鞘脂類分子,,存在于細(xì)胞膜中,參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)維持,。
它由一個(gè)鞘氨醇骨架和一個(gè)脂肪酰基組成,,具有疏水性尾部和親水性頭部,。
1.細(xì)胞膜動(dòng)態(tài)研究
BODIPY TR-Ceramide 可以用于標(biāo)記細(xì)胞膜中的脂質(zhì),觀察脂質(zhì)在細(xì)胞膜中的分布和動(dòng)態(tài)變化,。
通過(guò)熒光顯微鏡成像,,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞膜的流動(dòng)性和脂質(zhì)的聚集情況。
2.脂質(zhì)代謝研究
由于 Ceramide 是細(xì)胞膜的重要組成部分,,BODIPY TR-Ceramide 可以用于研究脂質(zhì)代謝過(guò)程,。
通過(guò)標(biāo)記和追蹤 Ceramide 的代謝路徑,可以了解細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的合成,、運(yùn)輸和降解過(guò)程,。
3.細(xì)胞凋亡研究
Ceramide 在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用,BODIPY TR-Ceramide 可以用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡過(guò)程中的脂質(zhì)變化,。
通過(guò)熒光成像,,可以觀察 Ceramide 在細(xì)胞凋亡中的積累和分布變化。
4.熒光標(biāo)記與成像
BODIPY TR-Ceramide 可以用于標(biāo)記和追蹤脂質(zhì)體,、納米顆?;蚱渌|(zhì)載體。
它的遠(yuǎn)紅光熒光特性使其適合用于多色成像,,與其他熒光標(biāo)記物同時(shí)使用時(shí),,可以減少光譜重疊,。
CAS:571186-05-5
英文名:BODIPY TR-Ceramide,Golgi-Tracker Red
分子式:C39H50BN3O4F2S
分子量:705.71
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg,、5mg,、10mg
結(jié)構(gòu)式:
質(zhì)量控制:95%+
存儲(chǔ)條件:-20°C,避光,,避濕
用途:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,,不用于診治
注意事項(xiàng):取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,,將包裝從冰箱中取出,,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開(kāi)瓶蓋,,取用,。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,,擰緊瓶蓋裝入自封袋,,及時(shí)放入冰箱。
使用方法:
1.Golgi 工作液配制
1.1 制備儲(chǔ)存液
用 DMSO 配制 5 mM 儲(chǔ)備液,。
注意:建議將儲(chǔ)備液在 -20°C 或 -80°C 避光保存,,避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.2 工作液的配制
用預(yù)熱好的 PBS 或培養(yǎng)基溶液,,配制成 1-10 μM 的 Golgi 工作液,。
注:請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 Golgi 1-43 工作液濃度,且現(xiàn)用現(xiàn)配,。
2. 細(xì)胞染色(懸浮細(xì)胞)
2.1 收集細(xì)胞:1,000 g,,4°C,離心 3-5 分鐘,,棄去上清,。加入 PBS 洗滌兩次,每次 5 分鐘,。細(xì)胞密度在 1×106/mL,。
2.2 加入 1 mL Golgi 工作液,室溫孵育 20-30 分鐘,。
2.3 400 g,,4°C,離心 3-4 分鐘,,棄去上清,。
2.4 加入 PBS 洗滌細(xì)胞兩次,每次 5 分鐘,。
2.5 用 1 mL 無(wú)血清培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞后,,使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行觀察,。
3. 細(xì)胞染色(貼壁細(xì)胞)
3.1 將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無(wú)菌蓋玻片上。
3.2 從培養(yǎng)基中移出蓋玻片,,吸除多余培養(yǎng)基,。
3.3 加入 100 μL 染料工作液,輕輕晃動(dòng)使其覆蓋細(xì)胞,,孵育20-30 分鐘,。
3.4 吸去染料工作液,用培養(yǎng)基洗 2 次,,每次 5 分鐘,,使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行觀察。
注意事項(xiàng):
1. 建議儲(chǔ)存液在 -20℃ 下避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
2. 請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 Golgi 1-43 工作液濃度與孵育時(shí)間。
3. 或使用效果不佳,,去除細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí),,可用適量 Hanks 平衡鹽溶液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行洗滌。
4. 本試劑僅限于科學(xué)研究用 ,。
5. 為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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