來源：Quanterix生物技術

通過超靈敏免疫測定法測定血漿中蘇氨酸217磷酸化tau（p-tau217）已被證明是阿爾茨海默?。ˋD）的最佳生物標志物,。本研究旨在確定中國人血漿p-tau217的參考區(qū)間,，并評估其對AD的診斷價值。我們招募了150名認知功能未受損（CU）的個體,、60名AD癡呆患者,、30名AD導致的輕度認知功能障礙（MCI）患者、40名額葉變性（FTLD）患者和70名皮層下缺血性血管性癡呆（SIVD）患者,。使用單分子陣列測量血漿中p-tau217,、總tau、淀粉樣β（Aβ）42和Aβ40的濃度,。血漿p-tau217在鑒別AD患者與CU對照組,、FTLD患者和SIVD患者（AUC = 0.983、0.936,、0.892）以及鑒別MCI患者與CU對照組（AUC = 0.943）方面優(yōu)于其他生物標記物,。血漿p-tau217水平與有癥狀的AD患者的記憶力呈負相關,。在中國人群中，血漿p-tau217對AD的診斷準確性非常高,，即使是在早期階段,。

期刊：The Journal of Prevention of Alzheimer's Disease

2025年2月

研究機構：天津醫(yī)科大學總醫(yī)院，天津金域醫(yī)學檢驗實驗室

研究背景

阿爾茨海默?。ˋD）的發(fā)病率不斷上升,，預計到2050年將有超過1億人罹患該病，這已成為一項重大的全球性挑戰(zhàn),，并對社會和醫(yī)療機構構成嚴重威脅,。基于血液的生物標志物在篩查,、早期診斷,、跟蹤進展以及最終監(jiān)測AD治療效果方面具有很大的潛力。與其他血漿生物標記物相比,，血漿p-tau蛋白（通常采用超靈敏免疫測定法,，如單分子陣列（Simoa®）進行測量）在鑒別由CSF或PET生物標記物或尸檢結果支持診斷的AD患者方面表現(xiàn)最佳。在各種p-tau蛋白中,，蘇氨酸217處磷酸化的tau（p-tau217）在區(qū)分注意力缺失癥患者和其他神經(jīng)退行性疾病患者以及在輕度認知障礙（MCI）階段檢測注意力缺失癥病理方面具有最大的潛力,，p-tau217在AD的臨床前期和有癥狀階段都會隨著時間的推移出現(xiàn)顯著的淀粉樣蛋白依賴性變化，并且與AD臨床前期的臨床惡化和腦相關,。

Simoa®方法具有靈敏度和精確度,，可準確定量血漿中的痕量生物標志物。然而,，Simoa®方法測定的血漿p-tau217的診斷價值和臨界值尚未在中國人群中得到驗證,。因此，本研究的目的是：1）在年齡跨度較大的中國人群中建立血漿生物標志物（尤其是p-tau217）的參考區(qū)間（RIs）,；2）確定血漿p-tau217和其他生物標志物（包括Aβ40,、Aβ42和t-tau）在從MCI到癡呆的AD連續(xù)體中的診斷性能，以及它們在區(qū)分AD和其他常見類型癡呆中的價值,；以及3）分析AD連續(xù)體患者血漿生物標志物和認知功能之間的相關性。

實驗方法

研究人群

所有患者均來自天津醫(yī)科大學總醫(yī)院記憶門診,，由癡呆癥專家根據(jù)特定診斷標準進行診斷,，包括60名AD癡呆患者、30名MCI患者,、40名額顳葉變性(FTLD)患者和70名皮質(zhì)下缺血性血管性癡呆(SIVD)患者,；所有患者年齡為42–84歲。由另外兩個中心招募了150名認知無障礙(CU)健康個體,，這些個體沒有主觀認知下降的癥狀,，神經(jīng)系統(tǒng)或神經(jīng)心理學檢查結果正常,。

生物標志物分析

血液使用EDTA管收集，并在抽取后2小時內(nèi)離心（2500 rpm×15 分鐘,，4°C）,。然后將血漿分裝到聚丙烯管中，并在?80 °C下儲存直至分析,。所有樣品在測試前再次離心（12,000 rpm×5分鐘,，4°C），利用Quanterix的Simoa®酶聯(lián)免疫測定HD-X平臺對生物標志物濃度進行定量,。使用ALZpath Simoa p-tau217 v2試劑盒（Quanterix,104371）檢測血漿p-tau217,。使用Neurology 3-Plex Assay A Kit (Quanterix,101995)測量血漿Aβ42、Aβ40和t-tau水平,。

統(tǒng)計分析

采用SPSS 26.0,、GraphPad Prism 8.0版軟件和R統(tǒng)計軟件4.3.0版進行統(tǒng)計分析。采用受試者工作特征（ROC）曲線檢驗血漿生物標志物在AD患者與CU之間以及AD患者與其他類型癡呆患者之間的判別性能,。計算AUC,、截點以及相關的敏感度和特異度。

研究結果

1. 參考區(qū)間建立

共分析了240個樣本,，樣本來自CU（n = 150）,、MCI患者（n = 30）和AD患者（n = 60），以確定血漿生物標志物的RI,。本研究中的RI為血漿p-tau217 0.006-0.47 pg/mL（圖1）,，t-tau為 1.320-5.678pg/mL，Aβ42為3.91-12.0 pg/mL,，Aβ40為106-284 pg/mL,，Aβ42/40比率為0.025-0.057。

圖1 血漿p-tau217參考區(qū)間

2.組間血漿生物標志物水平差異

各組血漿p-tau217水平存在顯著差異（圖 2）,。AD組和MCI組的血漿p-tau217水平顯著高于CU對照組和其他兩組患者（所有p < 0.001）,，并且AD組高于MCI組（p < 0.001）。AD組和MCI組的Aβ42/Aβ40比值顯著低于CU對照組（vs.AD,，p<0.001,；vs.MCI，p<0.001）和FTLD組（vs.AD,，p<0.001,；vs.MCI，p<0.001）,，AD組顯著低于SIVD組（p=0.005）,，SIVD組顯著低于FTLD組（p=0.002）和CU組（p=0.002）。血漿t-tau水平，各組間無明顯差異（p=0.862）,。

圖2 血漿生物標志物

3.血漿生物標志物的診斷和鑒別性能

生成了每種生物標志物與診斷狀態(tài)相關的ROC曲線（圖 3）,，結果顯示血漿p-tau217在區(qū)分AD患者與CU（AUC = 0.983，95% CI 0.941–0.998,，p < 0.001）,、FTLD患者（AUC = 0.936，95% CI 0.869–0.975,，p < 0.001）和SIVD患者（AUC = 0.892,，95% CI 0.825–0.939，p < 0.001）方面具有最佳的診斷分類性能,。血漿Aβ42濃度和Aβ42/Aβ40比率在區(qū)分AD患者與CU（AUC = 0.715,，95 % CI 0.625–0.793，p < 0.001,；AUC = 0.760,，95 % CI 0.674–0.833，p < 0.001）和FTLD患者（AUC = 0.842,，95 % CI 0.756–0.907,，p < 0.001；AUC = 0.780,，95 % CI 0.686–0.857,，p < 0.001）方面表現(xiàn)良好，但與SIVD患者（AUC = 0.578,；AUC = 0.644）的表現(xiàn)不佳,。血漿p-tau217在識別AD所致MCI患者方面的準確性也高于血漿Aβ42/Aβ40比率（AUC = 0.764, 95 % CI 0.662–0.847, p < 0.001）。然而,，血漿t-tau和Aβ40 的診斷準確性較差,，其AUC均小于0.70。

圖3 AD和MCI患者血漿生物標志物的診斷和鑒別準確性

4.血漿生物標志物在AD連續(xù)體中的認知相關性

各組間所有五個認知領域的MMSE評分和z評分均存在顯著差異,。在AD和MCI患者中,，血漿p-tau217水平與記憶（r = ?0.291，p = 0.007）,、信息處理（r = ?0.234,，p = 0.033）和視覺空間功能（r = ?0.259，p = 0.017）呈負相關（圖4B,、C,、F）。然而,，在調(diào)整年齡、性別和教育程度后，只有與記憶領域的相關性仍然顯著（r = ?0.218,，p = 0.047）,。認知功能與血漿Aβ生物標志物或t-tau之間沒有顯著相關性。

圖4 阿爾茨海默癥患者血漿p-tau217濃度與認知功能的相關性

結果與討論

本研究在中國人群中建立了用Simoa®測量的血漿生物標志物,，特別是p-tau217的參考區(qū)間,。與CU相比，AD引起的MCI患者的血漿p-tau217顯著升高,，而AD癡呆患者p-tau217進一步升高,。血漿p-tau217對AD的診斷和鑒別準確率明顯高于其他血漿生物標志物。在AD連續(xù)體患者中,，血漿p-tau217水平與認知功能（尤其是在記憶領域）存在相關性,。結果表明，血漿p-tau217是一種反映AD淀粉樣蛋白和tau病理的生物標志物,，可應用于廣泛的臨床實踐,，包括AD患者的識別和區(qū)分。本研究確定了中國人群血漿p-tau217 的診斷和鑒別值,，包括年齡范圍廣泛的CU個體,、從MCI到癡呆的AD連續(xù)體患者，以及患有其他類型癡呆癥（如FTLD和SIVD）的患者,。在本研究中,，我們證明了用Simoa®測量的血漿p-tau217對中國隊列中的AD具有出色的診斷性能。血液中p-tau217的檢測有望成為臨床實踐中的寶貴補充,，作為懷疑或排除AD病理的快速篩查測試以及指導和評估DMT的使用,。