Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase 來源于枯草桿菌(Bacillus stearothermophilus)的DNA聚合酶,,能夠耐受高溫(最高可達65°C),,保持較高的活性。Bst DNA聚合酶具有熱穩(wěn)定性高,、不具外切活性,、高保真和較高活性等優(yōu)點,使其非常適合用于高溫PCR及需要單鏈末端產(chǎn)物和高保真序列的實驗,。Bst DNA聚合酶本身不具有5'→3'外切酶活性和3'→5'外切酶活性,,可以產(chǎn)生帶單鏈過伸端的PCR產(chǎn)物。這有利于其用于一些需要帶單鏈末端產(chǎn)物的實驗,,如CRISPR等,。Bst DNA聚合酶在產(chǎn)物克隆和測序、酶促研究以及技術(shù)和產(chǎn)品開發(fā)等領(lǐng)域有重要應(yīng)用,。Bst DNA聚合酶可以實現(xiàn)LAMP產(chǎn)物的高保真和快速擴增,,縮短反應(yīng)時間,提高效率,,且易于操作,,這為LAMP技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用提供重要支持。
特點:
1. 高保真
Bst DNA聚合酶具有較高的DNA復(fù)制保真度,,可以準確擴增DNA序列,,產(chǎn)生高保真的擴增產(chǎn)物。這使其非常適合用于對擴增產(chǎn)物序列要求較高的實驗,。
2. 較高活性
Bst DNA聚合酶具有較高的DNA聚合活性,,可以在較短時間內(nèi)完成DNA的復(fù)制和擴增,,實現(xiàn)快速PCR擴增。這可縮短PCR反應(yīng)時間,,加快擴增進程,。
3. 易操縱
Bst DNA聚合酶易于精制和純化,價格較低廉,,使用也較為方便,,這使其成為常用的DNA聚合酶之一。
Bst DNA聚合酶應(yīng)用較廣泛:
1. 高溫PCR
Bst DNA聚合酶能耐高溫,,可以用于高溫PCR,,擴增GC含量高和復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板。這在擴增一些病原體DNA和環(huán)境DNA時具有重要意義,。
2. CRISPR/Cas9基因編輯
CRISPR/Cas9系統(tǒng)需要帶單鏈過伸端的gRNA和線性化質(zhì)粒,,Bst DNA聚合酶不具外切活性,可以用于制備這些產(chǎn)物,。
3. 產(chǎn)物克隆
使用Bst DNA聚合酶可以產(chǎn)生帶dA突出端的PCR產(chǎn)物,易于使用TA克隆進行克隆,,這為一些實驗提供方便,。
4. 測序
Bst DNA聚合酶可以產(chǎn)生高質(zhì)量的PCR產(chǎn)物,這為基因測序等實驗提供理想的模板,。
5. 酶促動力學(xué)研究
Bst DNA聚合酶易于純化和定量,,其酶促動力學(xué)研究具有重要理論意義。
6. 技術(shù)開發(fā)
Bst DNA聚合酶用于LAMP,、RPA,、SMRT測序等技術(shù)的開發(fā),拓展科研方法和手段,。
7. 生物反應(yīng)器
Bst DNA聚合酶可以配合生物反應(yīng)器連續(xù)產(chǎn)生PCR產(chǎn)物,,這在一些生產(chǎn)過程中具有應(yīng)用。
8. 檢測試劑盒
許多PCR檢測試劑盒選擇Bst DNA聚合酶作為DNA聚合酶,,用于病原體的檢測,。
Bst DNA聚合酶在LAMP技術(shù)的應(yīng)用:
1. 高保真
Bst DNA聚合酶具有較高的DNA復(fù)制保真度,可以準確擴增DNA序列,,實現(xiàn)LAMP產(chǎn)物的高保真擴增,。這對LAMP產(chǎn)物的序列要求較高的應(yīng)用具有重要意義。
2. 熱穩(wěn)定
Bst DNA聚合酶能夠耐受LAMP反應(yīng)的高溫(通常65°C),,在此溫度下保持較高活性,,可以實現(xiàn)快速的等溫擴增。這使LAMP反應(yīng)時間大大縮短,,加快檢測速度,。
3. 不具外切活性
Bst DNA聚合酶本身不具有外切酶活性,,不會降解LAMP引物和產(chǎn)物的單鏈過伸端。這有利于LAMP反應(yīng)的進行和產(chǎn)物的穩(wěn)定,。
4. 較高活性
Bst DNA聚合酶具有較高的DNA聚合活性,,可以在LAMP反應(yīng)溫度下快速完成DNA鏈的合成,實現(xiàn)快速等溫擴增,。這也可縮短LAMP反應(yīng)時間,,提高擴增效率。
5. 易操作
Bst DNA聚合酶較易純化和使用,,這使其適合用于LAMP技術(shù)的商業(yè)化和普及,。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。