使用包含納米結(jié)構(gòu)技術(shù)的溶膠凝膠處理技術(shù),在固態(tài)硅膠核上培養(yǎng)出均一穩(wěn)定的多孔外殼,,形成核-殼顆粒,。該顆粒形態(tài)會產(chǎn)生比全多孔顆粒更小的譜帶展寬,從而帶來較高的柱效,。色譜柱安裝
色譜柱標(biāo)簽上的箭頭表明流動方向,。在使用或反向沖洗Kinetex 1.3µm色譜柱時,切勿與箭頭方向相反,。Phenomenex建議使用HPLC/UHPLC Sure-Lok™耐高壓PEEK陽性螺母接頭來安裝Kinetex柱至HPLC/UHPLC系統(tǒng)上,。便捷的單件設(shè)計(AQ0-8503)能耐受至12000psi(827bar)的壓力。而三件式單元(AQ0-8504和AQ0-8505)包含一個PEEK螺母,、套管和不銹鋼扣緊環(huán),,能提供不漏連接,并且能耐受至19000psi(1310bar)的壓力,。方便的螺母擰緊工具(AQ0-8530)可幫助實現(xiàn)不漏連接,。• Kinetex C18、XB-C18,、 C8,、和 Phenyl-Hexyl色譜柱于pH 1.5至10*穩(wěn)定且可用于典型的反相流動相(甲醇水、乙腈水或適當(dāng)?shù)木彌_鹽水溶液/甲醇或緩沖鹽水溶液/乙腈的混合物),。• Kinetex PFP色譜柱于pH 1.5至8.5穩(wěn)定,,可用于典型的反相流動相(甲醇水、乙腈水或適當(dāng)?shù)木彌_鹽水溶液/甲醇或緩沖鹽水溶液/乙腈的混合物),。 • Kinetex HILIC色譜柱于pH 2至7.5穩(wěn)定,,可用于典型的HILIC流動相(乙腈/緩沖鹽水溶液的混合物)。* 僅適用于等度條件,。
請只使用高純度的試劑和較高 品質(zhì)的色譜級溶劑來制備流動相,。痕量雜質(zhì)可能會大幅度減少柱壽命。所有流動相在使用前都需經(jīng)過濾和脫氣,。請確保樣品和基質(zhì)能wan全溶解于流動相,,不相溶的溶劑或緩沖鹽沉淀可永jiu損害色譜柱。 |
請仔細閱讀這些注意事項:
• 在低于每種Kinetex色譜柱的pH值下限下操作,,因為這將會水解鍵合相• 在高于每種Kinetex色譜柱的pH值上限下操作,,因為這將會溶解硅膠• 在使用或反向沖洗Kinetex 1.3um色譜柱時,與色譜柱標(biāo)簽箭頭方向相反Kinetex 5μm與2.6µm色譜柱的zui高操作壓力是8700psi(600bar*),、Kinetex 1.7µm與1.3μm 色譜柱的zui 高操作壓力是15000psi(1000bar),。流動相流速設(shè)置應(yīng)使色譜柱背壓不超過zui 高操作壓力,。請注意、在zui高壓力下或接近zui 高壓力下操作會導(dǎo)致柱壽命縮短,。* 2.1mm ID色譜柱的背壓可穩(wěn)定至1000bar,。Kinetex色譜柱使用的zui高溫度達60°C。25°C以上可以降低流動相粘度和背壓,、提高傳質(zhì)率以及增強選擇性,。當(dāng)在高pH值(>8)下操作時,建議降低運行溫度以延長柱壽命,。請注意,,在zui高溫度下或接近zui高溫度下操作會導(dǎo)致柱壽命縮短。
如果您的柱壓持續(xù)升高,,您可以使用以下建議的低流速反沖洗色譜柱(不適合用于任何Kinetex 1.3μm色譜柱或其他制造商的色譜柱):
反相 (C18,、XB-C18、C8,、Phenyl-Hexyl和PFP)
Kinetex反相色譜柱以10至20倍柱體積的下列溶劑沖洗HILIC
Kinetex HILIC色譜柱以10至20倍柱體積的下列溶劑沖洗:2)95%100mM醋酸銨,pH 5.8/5%乙腈反相(C18,、XB-C18,、C8、Phenyl-Hexyl和PFP)色譜柱幾天不用時,,應(yīng)保存在≥50%(v/v)乙腈/水或甲醇/水中,。如果流動相含緩沖鹽,保存前請先用10至20倍柱體積的水/乙腈或水/甲醇沖洗色譜柱以去除緩沖鹽,。沖洗色譜柱后請用柱塞頭旋緊色譜柱,,以防保存溶劑揮發(fā)和柱床變干。HILIC
色譜柱幾天不用時,,應(yīng)保存在90%(v/v)乙腈/水中,。如果流動相含緩沖鹽,保存前請先用10至20倍柱體積的乙腈/水(90:10)沖洗色譜柱以去除緩沖鹽,。沖洗色譜柱后請用柱塞頭旋緊色譜柱,,以防保存溶劑揮發(fā)和柱床變干,。使用Kinetex1.3μm色譜柱應(yīng)避免并降低流動相儲液器以及UHPLC溶劑輸送泵中微生物的滋生,。以下是幾個常用技巧:
溶劑:使用超 純、較高 品質(zhì)的UHPLC溶劑,。水性流動相:每天更換或加入5-10%的有機溶劑,。流動相儲液器:在重新注入流動相前,使用甲醇沖洗儲液器,。UHPLC系統(tǒng):每周使用異丙醇和甲醇沖洗,。
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