Hoechst 33258是一種雙苯咪唑類熒光染料,,能夠特異性結(jié)合雙鏈DNA(dsDNA)的腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)小溝處。
熒光特性:Hoechst 33258-DNA復合物的激發(fā)波長為350 nm,,發(fā)射波長為460 nm,。
用途:用于細胞核染色、細胞凋亡檢測,、DNA染色等。
細胞核染色:可用于活細胞,、固定細胞或組織,、石蠟切片的細胞核染色。
細胞凋亡檢測:凋亡細胞的細胞核會發(fā)出明亮的藍色熒光,,而正?;罴毎臒晒鈴姸容^弱。
流式細胞術(shù)和熒光顯微鏡檢測:可用于細胞周期分析和DNA含量檢測,。CAS:23491-45-4
英文名:Hoechst 33258
分子式:C25H27Cl3N6O
分子量:533.88
外觀:黃色粉末
規(guī)格標準:1mg,、5mg、10mg
結(jié)構(gòu)式:
質(zhì)量控制:95%+
存儲條件:-20°C,,避光,,避濕
用途:僅供科研實驗使用,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,,打開瓶蓋,,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,,擰緊瓶蓋裝入自封袋,,及時放入冰箱。
操作方法:
活細胞染色:
將Hoechst 33258染色液按照1:100的比例加入細胞培養(yǎng)液中(終濃度為10 μg/ml),,混勻后在37℃孵育10-20分鐘,。
染色后可直接在熒光顯微鏡下觀察。
固定細胞或組織染色:
固定后用PBS洗滌2-3次,,加入10 μg/ml的Hoechst 33258染色液,,室溫避光孵育5分鐘。
洗滌后在熒光顯微鏡下觀察,。
注意事項:
Hoechst 33258需避光保存,,實驗過程中注意避光操作。
初次實驗時,,建議嘗試不同濃度(0.5-10 μg/ml)以優(yōu)化染色效果,。
熒光染料長時間暴露在光線下可能會淬滅,建議染色后盡快完成檢測,。
該染料對人體有一定刺激性,,實驗時需佩戴防護裝備。
相關試劑:
Mito-Tracker Deep Red FM
PKH 26
DiI
DiR
DAPI
LysoTracker Blue DND-22
Hoechst 33258 trihydrochloride
SYBR GreenⅠ
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