1,、常規(guī)的細胞凍存主要采用DMSO+血清的方式，賽爾瑞成進行凍存液的無血清、低（無）DMSO,、無蛋白這些方向持續(xù)開發(fā)的原因是什么？

        細胞凍存液的研發(fā)歷史可以追溯到20世紀中期,，隨著細胞生物學和低溫生物學的發(fā)展,，凍存液逐漸優(yōu)化和改進。20世紀60年代,，DMSO成為常用冷凍保護劑,，廣泛應用于細胞凍存。隨后,，凍存液中開始添加胎牛血清（FBS）等成分,，提供營養(yǎng)和保護。20世紀80年代,，科學家優(yōu)化凍存液配方,，調(diào)整DMSO和血清濃度,，減少毒性并提高凍存效果。

        DMSO作為常用的冷凍保護劑,，在較高濃度或長時間暴露下會對細胞產(chǎn)生毒性,，影響細胞活力和功能。因此降低其濃度或?qū)ふ姨娲肥潜匾摹?br/>血清因其成分復雜,、存在批次差異,、成分不明確、存在病原體污染風險等原因,，應用無血清凍存液已成為細胞凍存領(lǐng)域主流,。

        蛋白在凍存液中的添加可能為后續(xù)實驗和監(jiān)管引入不可控的變量，且高質(zhì)量蛋白成本高,，往往會提高凍存液的成本,。

        賽爾瑞成自2018年推出第一款經(jīng)典的無血清細胞凍存液以來，CRD系列無血清細胞凍存液因其過硬且穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量,，獲得了國內(nèi)數(shù)百家實驗室和企業(yè)用戶的認可,，廣泛服務于國內(nèi)細胞生物學研究和應用。

        2,、應用CRD系列凍存液進行細胞凍存前需要注意什么,？

        由于各類動物細胞株（系）通常都比較脆弱，對所處的環(huán)境要求較高,，而細胞凍存是讓人工干預,，強行讓細胞處于一種缺營養(yǎng)的“冬眠”狀態(tài)，所以凍存之前的細胞狀態(tài)對凍存的效果非常關(guān)鍵,，建議凍存之前,，務必讓細胞處于良好的對數(shù)期狀態(tài)，凍存之前細胞存活率應接近或達到100%,。對于貼壁細胞,，凍存之前，胰酶消化要適度,，吹散和重懸動作要適當,，以免損傷細胞狀態(tài)。過度消化或未輕柔吹打和重懸的細胞由于狀況較差,，通常不宜再冷凍保存,。觀察凍存前的細胞狀態(tài)應該在消化重懸完成后進行，以確認凍存時的細胞狀態(tài)良好,。

        3,、應用賽爾瑞成的CRD系列無血清細胞凍存液發(fā)現(xiàn)有的細胞凍存效果不好？有什么建議,？

        CRD系列無血清細胞凍存液主要依據(jù)成分的差異進行產(chǎn)品命名,，均為通用型細胞凍存液,，經(jīng)過廣泛測試驗證，適用于絕大多數(shù)哺乳動物（包括人）原代細胞,、傳代細胞系以及雜交瘤細胞的凍存等,。
        因為細胞來源各異、種類繁多,，并且新的細胞株（系）不停的涌現(xiàn),，甚至許多細胞都是經(jīng)過工程化改造的細胞系，我們無法對市場上所有細胞株（系）進行全面驗證,。因此,，對于某些較為珍貴的細胞，建議用戶先進行短期（如一周以內(nèi)）凍存效果預實驗,，或者同時使用傳統(tǒng)含血清的常規(guī)凍存液進行對比測試,，確認無誤后再進行正式批量凍存。

        4,、凍存液瓶底出現(xiàn)沉淀,，是不是產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)問題？

        凍存液中沉淀的出現(xiàn)一般存在如下三種情況：

      （1）溶液配置,、過濾分裝過程中,，異物的帶入。賽爾瑞成的無血清細胞凍存液的生產(chǎn)過程均嚴格按照GMP體系進行管理,，尤其在產(chǎn)品質(zhì)檢和出庫前會進行雙重質(zhì)檢,，在外觀上能夠杜絕此類現(xiàn)象的發(fā)生。這種情況,，在我們的產(chǎn)品中罕見發(fā)生,。

      （2）溶液染菌。賽爾瑞成無血清細胞凍存液生產(chǎn)過程中有一個非常重要的步驟是用0.22μm孔徑濾膜進行除菌過濾,，且整個操作過程是在百級的環(huán)境中進行操作。此外,，我們會對每批終產(chǎn)品出廠前進行無菌檢測,，確保終產(chǎn)品沒有染菌。

        為避免客戶在使用凍存液時,，產(chǎn)生細菌污染,，建議如下：
        ①在超凈工作臺或生物安全柜中進行操作，同時使用無菌的移液器,、吸頭和容器,，操作前后用75%乙醇或消毒劑清潔雙手。
        ②根據(jù)實驗需要,，可以將大包裝凍存液分裝成小份進行保存,，減少反復開啟瓶蓋帶來的污染風險,；

      （3）鹽溶液析出
        為保證達到更優(yōu)的保護效果，CRD系列無血清細胞凍存液含有維持細胞狀態(tài)良好的復合鹽離子成分,，因此,，在低溫保存一段時間后，瓶底可能會出現(xiàn)少量飽和析出的固體鹽沉淀,，經(jīng)嚴格測試,，對細胞凍存保護效果無任何不利影響，此時只需取用上清,，正常使用即可,，或者離心去除沉淀或者用過濾器（0.22μm孔徑濾膜）過濾去除少許沉淀。一般飽和析出不會發(fā)生第二次,。

        若您在使用賽爾瑞成CRD系列無血清細胞凍存液過程中遇到任何問題,，歡迎隨時與我們聯(lián)系。