光源及激發(fā)原理

• 熒光成像：需要使用特定波長的激發(fā)光源,，如紫外光或可見光中的某些特定波長光,。熒光基團在吸收激發(fā)光的能量后，電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),，處于激發(fā)態(tài)的電子不穩(wěn)定,，會迅速回到基態(tài)，并以發(fā)射熒光的形式釋放出能量,，發(fā)射光的波長通常比激發(fā)光長,。例如，常用的綠色熒光蛋白（GFP）,，在藍光或紫外光的激發(fā)下,，會發(fā)射出綠色熒光。

• 白光成像：使用的是普通的白色光源,，如鎢絲燈,、熒光燈或 LED 白光燈等。白光包含了可見光范圍內(nèi)的各種波長的光，其作用是提供均勻的照明,，使凝膠中的樣品能夠被觀察到,。

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樣品與光的相互作用

• 熒光成像：主要依賴于樣品中熒光標(biāo)記物的熒光發(fā)射特性。只有標(biāo)記了熒光基團的目標(biāo)分子或本身具有熒光特性的物質(zhì)才能產(chǎn)生熒光信號被檢測到,。例如在核酸電泳實驗中,，若使用了熒光染料如 EB（溴化乙錠）來標(biāo)記核酸，EB 插入到核酸分子的堿基對之間,，在紫外光激發(fā)下發(fā)出熒光,，從而顯示出核酸在凝膠中的位置和分布。

• 白光成像：基于樣品對白光中不同波長光的吸收,、散射和透射等物理現(xiàn)象,。樣品中的不同成分對白光的吸收和散射程度不同，從而產(chǎn)生明暗對比,，形成圖像,。例如，在考馬斯亮藍染色的蛋白質(zhì)凝膠中,，蛋白質(zhì)與染料結(jié)合后,，對白光的吸收增強，與未結(jié)合染料的凝膠部分形成對比,，使蛋白質(zhì)條帶可見,。

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成像檢測原理

• 熒光成像：通過配備的熒光濾光片組和高靈敏度的探測器來捕捉熒光信號。濾光片組能夠選擇性地讓特定波長的激發(fā)光通過照射樣品,，同時阻擋其他波長的光,，只允許熒光發(fā)射光通過并到達探測器。探測器將熒光信號轉(zhuǎn)化為電信號或數(shù)字信號,，經(jīng)過處理后在顯示器上呈現(xiàn)出熒光圖像,，圖像中熒光強度反映了樣品中熒光標(biāo)記物的含量或分布情況。

• 白光成像：利用普通的光學(xué)成像原理,，通過鏡頭將樣品反射或透射的白光聚焦到探測器上,，探測器記錄下光的強度和顏色信息，形成彩色或黑白的圖像,。成像過程中通常會有一些光學(xué)元件來調(diào)節(jié)光線的強度,、方向和聚焦程度，以獲得清晰的圖像,。