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引物合成儀是一種專(zhuān)門(mén)用于合成短鏈寡核苷酸（即引物）的自動(dòng)化設(shè)備,，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),、遺傳學(xué),、醫(yī)學(xué)診斷等領(lǐng)域,。其技術(shù)原理主要基于固相亞磷酰胺三酯法,，通過(guò)四步循環(huán)反應(yīng)（脫保護(hù),、耦合,、封閉和切割）完成鏈延伸。
在操作過(guò)程中,，引物合成儀首先脫掉附加在固相載體（如CPG擔(dān)體）上的第一個(gè)堿基5'-OH基團(tuán)上的保護(hù)基（DMTr）,，然后活化新的堿基單體，使其與第一個(gè)堿基發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),。接著,，將未反應(yīng)的堿基5'-OH加帽封死，防止錯(cuò)誤延伸,。隨后,，將核苷亞磷酸酯氧化成更穩(wěn)定的核苷磷酸酯。這一過(guò)程循環(huán)進(jìn)行,，直至合成完所需的OligoDNA序列,。
合成結(jié)束后，引物需要從固相載體上切割下來(lái),，并進(jìn)行純化,。純化后的引物質(zhì)地疏松，需要加入適量的去離子無(wú)菌水或緩沖液進(jìn)行溶解,。溶解后的引物可以在-20℃條件下長(zhǎng)期保存,。
引物合成儀具有高度的自動(dòng)化和精確性，能夠自動(dòng)完成試劑的添加,、反應(yīng)的控制,、產(chǎn)物的收集等步驟。同時(shí),，現(xiàn)代引物合成儀還具備高通量合成能力,，可以同時(shí)合成多個(gè)引物，滿足大規(guī)模實(shí)驗(yàn)的需求,。
為確保引物合成的質(zhì)量和準(zhǔn)確性,，操作人員需要具備一定的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)資質(zhì)，并熟悉設(shè)備的操作指南和維護(hù)方法,。此外,，還需要詳細(xì)記錄每批次合成的實(shí)驗(yàn)條件、試劑批號(hào)及質(zhì)檢圖譜等信息,，以便進(jìn)行質(zhì)量追溯和問(wèn)題排查,。
綜上所述，引物合成儀以其高效,、精確,、自動(dòng)化的特點(diǎn)，在分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用,。
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