摘要本應用簡報介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質譜聯(lián)用系統(tǒng)測定化妝品中禁用物質秋水仙堿和秋水仙胺含量的方法,。該方法操作簡便,、靈敏度高,；在 0.1–200 µg/L 的濃度范圍內表現(xiàn)出良好的線性,；在化妝品空白基質中的兩種加標濃度下,，目標化合物的回收率在 93%–111% 之間,，且六次平行測定結果的相對標準偏差在 1.5%–7.3% 之間,，表現(xiàn)出良好的準確度和精密度。該方法適用于化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測,。

前言化妝品作為美容和個人護理產(chǎn)品,，直接影響消費者的皮膚健康和整體福祉。近年來,，隨著消費者對安全,、健康的日益關注，越來越多化妝品中開始添加純植物提取的中草藥成分,，以實現(xiàn)天然保濕,、抗炎等護膚目的。但是,，所添加的中草藥成分在產(chǎn)生功效的同時,，也有可能引入具有毒性的生物堿類化合物，如秋水仙堿及其鹽類,。如果消費者長期使用含有此類生物堿類化合物的化妝品,，會損傷肝、腎和骨髓等器官,，引起嘔吐,、腹瀉、腹痛,、胃腸等不良反應[1],。為保障消費者的健康和權益,，監(jiān)管機構嚴禁化妝品中使用秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺。目前,，針對化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測方法包括高效液相色譜法 (HPLC),、氣質聯(lián)用法 (GC-MS) 等,。其中,，HPLC 法操作簡單，但選擇性差,、靈敏度有限,，不適用于痕量檢測；GC-MS 法選擇性高,，但需要對樣品進行衍生,，操作復雜，重現(xiàn)性差,。相比之下,，液相色譜-三重四極桿質譜聯(lián)用法 (LC-MS/MS) 作為一種高效、靈敏且可靠的分析技術,，正逐漸成為化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測方法[2],。本文介紹了一種采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質聯(lián)用系統(tǒng)檢測化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的方法。該方法簡單,、靈敏度高且準確可靠,，適用于準確測定化妝品中的痕量秋水仙堿和秋水仙胺。

實驗部分試劑和樣品實驗用甲醇,、乙腈,、正己烷、甲酸均為色譜純,，購自美國 Fisher公司,；乙酸銨溶液購自德國 Merck 公司；實驗用水為經(jīng) Milli-Q 系統(tǒng)凈化的超純水（電阻率 18.2 MΩ）,；秋水仙堿和秋水仙胺標準品購自天津阿爾塔科技公司,；實驗用化妝品樣品購自北京市場。儀器和設備采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質聯(lián)用系統(tǒng),；以及渦旋混勻器（德國 IKA 公司）,、KQ-500B 型超聲儀（昆山市超聲器有限公司）、TD5A-WS 離心機（湖南湘儀離心機儀器有限公司）和 Milli-Q 超純水裝置（德國 Merck 公司）

樣品前處理稱取 1.0 g 樣品,，準確加入 10 mL 用正己烷飽和的甲醇乙腈 (1/1)溶液,，渦旋混勻后，超聲提取 15 min,；然后以 9500 r/min 離心5 min,，取上清液 5 mL 于 10 mL 容量瓶中,，用水定容至刻度，混勻,；取 5 mL 加入 15 mL 離心管中,，加入 5 mL 正己烷，渦旋混合,；然后以 9500 r/min 離心 5 min,，棄去上層，并將下層清液用過濾膜過濾后待測[3],。

液相色譜條件色譜柱： Agilent Eclipse Plus C18, 2.1 × 100 mm,1.8 µm（部件號 959758-902）柱溫： 40 °C進樣量： 2 µL流動相： A) 含 0.1% 甲酸和 5 mmol/L 乙酸銨的水溶液,；B) 甲醇流速： 0.3 mL/min梯度程序： 時間 (min) B (%) 0 10 5 100 7 100后運行時間：3 min

質譜條件離子模式： ESI，正離子模式干燥氣溫度： 300 °C干燥氣流速： 8 L/min鞘氣溫度： 350 °C鞘氣流速： 11 L/min霧化器壓力： 25 psi毛細管電壓： 3000 V噴嘴電壓： 500 V多反應監(jiān)測 (MRM) 采集參數(shù)：見表 1

質譜與色譜條件的優(yōu)化秋水仙堿和秋水仙素屬于生物堿類化合物,，在電噴霧離子源正離子模式下容易產(chǎn)生 [M+H]+ 準分子離子峰,。采用濃度為 1 mg/L 的標準溶液，對質譜離子源和多反應監(jiān)測 (MRM) 離子對條件進行優(yōu)化,。優(yōu)化后的 MRM 參數(shù)如表 1 所列,。確定質譜條件后，選取色譜柱 Eclipse Plus C18 和 PoroshellEC-C18,，考察以水/甲醇和水/乙腈作為流動相,、以甲酸和乙酸銨作為添加劑時的分離效果。綜合考慮分離度,、峰形和分析效率等因素,，最終選取 Eclipse Plus C18 色譜柱和含 0.1% 甲酸和5 mmol/L 乙酸銨的水溶液/甲醇流動相體系。經(jīng)梯度優(yōu)化后,，所得秋水仙堿和秋水仙胺標樣 (10.0 µg/L) 的 MRM 提取色譜圖如圖 1 所示,。從圖中可以看出，秋水仙堿和秋水仙胺得到有效分離,，峰形良好,，且不受基質明顯干擾。

線性范圍采用外標法進行定量,，在 0.005–200 µg/L 的濃度范圍內考察方法線性,。結果如表 2 所示。從表中可以看出,，秋水仙堿和秋水仙胺分別在 0.01–100 µg/L 和 0.01–200 µg/L 的濃度范圍內獲得了良好的線性響應,，線性相關系數(shù) (R2) 高于 0.997，表明該方法具有較寬的線性范圍,。

方法準確度和精密度取空白乳液化妝品和膏狀化妝品,，分別以 2 µg/kg 和 20 µg/kg的濃度添加秋水仙堿和秋水仙胺，并且在每個加標水平下重復測定 6 次，對方法準確度和精密度進行評估,。結果如表 3 所列,。從表中可以看出，在低加標濃度下,，目標化合物的回收率在93.2%–110.7% 之間,，相對標準偏差在 4.3%–7.3% 之間；在高加標濃度下,，目標化合物的回收率在 93.5%–102.1% 之間,，相對標準偏差在 1.5%–3.2% 之間，表明該方法具有良好的準確度和精密度

實際樣品分析使用所開發(fā)的方法對購自北京市場的 6 種不同品牌的化妝品（包括祛痘消炎膏霜類 3 個,、清潔護膚乳液類 3 個）進行分析,，在所有樣品中均未檢出秋水仙堿和秋水仙胺。

結論本文介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質譜聯(lián)用法測定化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的方法,。該方法操作簡便、靈敏度高,、線性范圍寬,，且具有優(yōu)異的準確度和精密度，適用于測定不同類型化妝品中的痕量秋水仙堿和秋水仙胺,。