熒光顯微鏡是一種利用紫外線作為光源,,使被檢物體發(fā)出熒光,進而在觀察物體形狀和位置的特殊顯微鏡,。它常用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收,、運輸,、化學物質(zhì)的分布及定位等。它的成像依賴于熒光染料或熒光抗體對樣品的標記,,當樣品被激發(fā)光(如紫外線或藍光)照射時,,熒光物質(zhì)會吸收光子并重新發(fā)射出波長較長的光子,形成熒光現(xiàn)象,。
熒光顯微鏡的各組成部件發(fā)揮著關鍵作用,,下面將介紹它們的功能和特點。
1,、光源系統(tǒng)
采用高功率LED光源,,壽命>10,000小時,。光譜范圍365-770nm,,覆蓋常用熒光染料。配備智能調(diào)光系統(tǒng),,光強穩(wěn)定性±0.5%,。快速切換濾光片,,切換時間<50ms,。集成光強記憶功能,,便于實驗重復。
2,、物鏡系統(tǒng)
高數(shù)值孔徑物鏡,,NA值可達1.49。工作距離0.13-0.22mm,,適應不同樣品需求,。配備校正環(huán),補償蓋玻片厚度差異,。采用特殊鍍膜,,透光率>90%。支持油鏡,、水鏡,、干鏡多種類型。
3,、濾光片組
采用高精度干涉濾光片,,帶寬≤10nm。配備多組激發(fā)/發(fā)射濾光片,,適應常用熒光染料,。快速轉(zhuǎn)輪設計,,切換時間<100ms,。集成ND濾光片,光強調(diào)節(jié)范圍0.1-100%,。支持自定義濾光片組合,。
4、檢測系統(tǒng)
高靈敏度CCD相機,,量子效率>80%,。制冷溫度-30℃,暗電流<0.01e-/pixel/s,。分辨率可達2048×2048像素,。配備EMCCD模塊,適用于微弱熒光檢測,。集成光譜拆分系統(tǒng),,支持多色熒光分離。
5,、載物臺系統(tǒng)
電動掃描載物臺,,定位精度±0.1μm。行程范圍75×50mm,適應常規(guī)玻片尺寸,。配備多孔板適配器,,支持高通量篩選。集成Z軸聚焦系統(tǒng),,分辨率10nm,。支持多點定位和自動掃描。
6,、控制系統(tǒng)
采用專業(yè)圖像分析軟件,,支持3D重構(gòu)。配備自動曝光功能,,優(yōu)化圖像質(zhì)量,。集成熒光漂白校正模塊。支持多通道熒光疊加,。數(shù)據(jù)存儲容量≥2TB,,支持遠程訪問。
熒光顯微鏡通過以上精密部件的協(xié)同工作可實現(xiàn)高分辨率,、多色熒光成像,,了解各部件功能特點,有助于優(yōu)化實驗方案,,提高成像質(zhì)量,。
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