目前移液工作站根據(jù)移液泵的工作原理不同,可以分為空氣置換式,、液路式以及非接觸式,。不論移液泵的技術(shù)如何改變,,移液的精準度都是移液泵最靈魂的指標。下面小編從以下幾個方面,,給大家講講精準度的那些事,。
1、移液精準性重要性 無論在生物分子實驗領(lǐng)域還是其他分析測試領(lǐng)域,,移液的精準性在整個實驗過程中都會起到至關(guān)重要的作用,。一旦產(chǎn)生不可控的移液誤差,會直接影響整個測試數(shù)據(jù)的真實性,,以及分析結(jié)果的正確性,。因次,移液精準度是移液工作站最重要的技術(shù)指標,,沒有之一,。
2、移液精準度的定義
準確度(Accuracy)是指測定結(jié)果與真實值之間的接近程度,,以誤差來表示,。一般用來表示系統(tǒng)誤差的大小。誤差越小,,分析結(jié)果的準確度越高,。精密度(Precision)是指使用同種樣品進行重復測定所得到的結(jié)果之間的重現(xiàn)性。一般用來表示測定過程中隨機誤差的大小,。精密度通常以標準差或方差來量度,,方差越小,,精密度越高,。
準確度和精密度
3、移液精準度影響因素
氣密性氣密性主要表現(xiàn)在二個方面,,一是設(shè)備移液泵系統(tǒng)內(nèi)部的氣密性,,二是移液吸頭(Tip頭)與barrel之間配合的連接氣密性。
環(huán)境,,移液過程的溫度,、濕度、氣壓等外界環(huán)境都影響著移液精準度,,為了避免不準確的移液結(jié)果:
?、賾M量將移液吸頭和液體保持在同一溫度范圍內(nèi);
?、趯囟容^低的液體進行移液時,,在每次分液后更換吸頭,以防止吸頭溫度的變化 ,。
液體性質(zhì)移液工作站在處理較粘稠狀態(tài)物質(zhì)時,,使用原有吸排液參數(shù)進行移液,,很有可能出現(xiàn)移液準確度誤差較大的情況,因此,,在處理不同液體時要根據(jù)實際需要體積數(shù)值,,來進行校準補償工作站移液泵的系統(tǒng)參數(shù)。
移液吸頭移液吸頭的原材料質(zhì)量,、模具,、生產(chǎn)工藝技術(shù)、生產(chǎn)設(shè)備等都直接影響到吸頭的質(zhì)量穩(wěn)定性,,既而影響著移液的精準度,。如吸頭材質(zhì)或模具光滑度都會影響液體的殘留。
4,、精準度的檢測方法
1)精密度當測試體積小于1μL時,,建議使用分光光度法檢測。將液體工作站設(shè)定調(diào)至目標體積,,然后移取染料溶液,,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的吸光度,,重復幾次移液操作,,計算移液的精密度。當測試體積大于1μL時,,使用稱重法檢測,。通過對水的稱重,重復稱量幾次待測樣本質(zhì)量,,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),,計算移液的精密度。精密度計算公式:CV:相對標準偏差(RSD)=標準偏差(SD)/計算結(jié)果的算術(shù)平均值(X)*100%
2 ) 準確度
通常我們采用稱量法進行準確度的檢測,。通過對水的稱重,,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),鑒別移液的準確性,。
準確度計算公式:準確度A,,V=平均體積,V0=各體積A%(準確度)=(V -V0)/V注意:稱重法實驗室條件是高度靈敏的分析天平(定期校準),、雙蒸水和稱量容器,。水、移液器和吸頭必須具有相同的溫度(20℃時水的密度為0.09982),。
測試中的注意點:
環(huán)境條件
溫度控制在15-30℃,恒定在±0.5℃,相對濕度50-80%
分析天平量程的確定
精準度測試體積的確定
按照移液總量程的體積的100%,,50%,10%進行移液精準度測試,。
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