幾種常見的將細(xì)胞接種到玻片上的方法

來源：東地（北京）科技有限公司 2025年02月24日 09:14

以下是幾種常見的將細(xì)胞接種到玻片上的方法：

一,、直接滴加法

首先要準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液,。細(xì)胞懸液可以通過消化貼壁細(xì)胞獲得,，例如對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,，用胰蛋白酶 - EDTA 消化液處理細(xì)胞,，使細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫落,，然后加入適量的培養(yǎng)基終止消化,，并輕輕吹打制成單細(xì)胞懸液,。對(duì)于懸浮細(xì)胞,，可以直接收集培養(yǎng)基中的細(xì)胞，離心去除培養(yǎng)基中的雜質(zhì)和舊培養(yǎng)基后,，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。
選擇合適的蓋玻片。蓋玻片一般需要進(jìn)行消毒處理,，可以用 70% - 95% 的乙醇浸泡 30 分鐘左右,，然后晾干備用。蓋玻片的大小和厚度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇,，一般常用的尺寸為 18mm×18mm,，厚度在 0.17mm 左右。

將蓋玻片放置在培養(yǎng)皿中,。培養(yǎng)皿底部可以預(yù)先加入少量的培養(yǎng)基,，以防止蓋玻片移動(dòng)。
用微量移液器吸取適量的細(xì)胞懸液（一般根據(jù)細(xì)胞密度和實(shí)驗(yàn)需求,，細(xì)胞濃度可能在 1×10? - 1×10? 個(gè) /ml 之間）,，滴加在蓋玻片的一端。滴加的細(xì)胞懸液體積一般在 10 - 50μl 左右,，具體體積取決于蓋玻片的大小和細(xì)胞所需的接種面積,。
輕輕傾斜培養(yǎng)皿，使細(xì)胞懸液沿著蓋玻片緩慢流下,，均勻地分布在蓋玻片表面,。然后將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中，讓細(xì)胞在適宜的溫度（如 37℃）和二氧化碳濃度（一般為 5%）環(huán)境下附著和生長(zhǎng),。

二、使用細(xì)胞爬片法

和直接滴加法類似,，準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液和消毒后的蓋玻片,。
在細(xì)胞培養(yǎng)容器（如培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿）中加入適量的培養(yǎng)基，其量要能夠保證細(xì)胞在接種后有足夠的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,。

將蓋玻片平放在細(xì)胞培養(yǎng)容器底部,。注意蓋玻片之間不要相互重疊，并且要確保蓋玻片表面平整,。
將細(xì)胞懸液加入到培養(yǎng)容器中,，細(xì)胞會(huì)自然地附著在蓋玻片上,。在培養(yǎng)過程中，隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,，它們會(huì)逐漸在蓋玻片上形成單層（對(duì)于貼壁細(xì)胞）或聚集（對(duì)于懸浮細(xì)胞）,。
定期更換培養(yǎng)基，以維持良好的細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境,。一般每隔 2 - 3 天更換一次培養(yǎng)基,，直到細(xì)胞生長(zhǎng)到合適的密度，可以進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,，如免疫熒光染色,、細(xì)胞固定等。

三,、利用細(xì)胞接種器

準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液和經(jīng)過消毒處理的蓋玻片,。同時(shí)，準(zhǔn)備好細(xì)胞接種器,，這是一種專門用于將細(xì)胞均勻接種到玻片上的工具,，其設(shè)計(jì)可以精確控制細(xì)胞接種的量和分布。

將蓋玻片放置在細(xì)胞接種器的位置,。接種器通常有一個(gè)固定蓋玻片的裝置,，以確保在接種過程中蓋玻片不會(huì)移動(dòng)。
將細(xì)胞懸液加入到接種器的細(xì)胞懸液槽中,。根據(jù)接種器的使用說明,，調(diào)整細(xì)胞懸液的加入量和接種參數(shù)，如接種速度,、接種壓力等,。
啟動(dòng)細(xì)胞接種器，它會(huì)將細(xì)胞懸液均勻地噴灑或涂抹在蓋玻片表面,。這種方法可以得到非常均勻的細(xì)胞分布,，適用于一些對(duì)細(xì)胞分布均勻性要求較高的實(shí)驗(yàn)，如高通量藥物篩選實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞接種,。

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