使用C18柱的循環(huán)制備純化案例 三萜皂苷
色譜條件:
色譜柱為C18柱(直徑20×長500mm),;流動相乙腈:甲醇(3∶2),;體積流量5mL/min;柱溫:室溫,;檢測波長210 nm和RI檢測器,;進樣量6mL。
上:紫外譜圖,;下:RI譜圖
色譜分離:
將待分樣品溶于流動相乙腈:甲醇(3∶2),,采用 ODS C18色譜柱分離,分別用UV 檢測器及RI檢測器檢測峰信號(見上),。樣品通過色譜柱時檢測到4 個峰信號,,保留時間為50~85min。在保留時間為50 min 時啟動儀器的循環(huán)系統(tǒng),,不收集組分,,這樣可以把前面的雜質(zhì)峰除去,,只保留樣品峰,從而單獨使樣品在整個系統(tǒng)中循環(huán)一次,,相當于樣品兩次通過C18色譜柱,,進行兩次分離。在保留時間為100 min 時根據(jù)峰信號開始收集各組分,。
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