層析法是根據(jù)物質(zhì)的理化性質(zhì)不同而建立的分離分析方法,。根據(jù)層析峰的位置及峰高或峰面積,可以定性及定量,。層析法與光學(xué),、電學(xué)或電化學(xué)儀器連用,,可檢測(cè)出層析后各組份的濃度或質(zhì)量,同時(shí)繪出層析圖,。層析儀與電子計(jì)算機(jī)聯(lián)用,,可使操作及數(shù)據(jù)處理自動(dòng)化,大大縮短分析時(shí)間,。由于層析法具有分辨率高,、靈敏度高、選擇性好,、速度快等特點(diǎn),,因此適用于雜質(zhì)多、含量少的復(fù)雜樣品分析,,尤其適用于生物樣品的分離分析,。近年來,已成為生物化學(xué)及分子生物學(xué)常用的分析方法,。在醫(yī)藥衛(wèi)生,、環(huán)境化學(xué)、高分子材料、石油化工等方面也得到了廣泛的應(yīng)用,。
層析法是目前廣泛應(yīng)用的一種分離技術(shù),。本世紀(jì)初植物學(xué)家M.Tswett發(fā)現(xiàn)并使用這一技術(shù)證明了植物的葉子中不僅有葉綠素還含有其它色素。現(xiàn)在層析法已成為生物化學(xué),、分子生物學(xué)及其它學(xué)科領(lǐng)域有效的分離分析工具之一,。
層析法是利用不同物質(zhì)理化性質(zhì)的差異而建立起來的技術(shù)。所有的層析系統(tǒng)都由兩個(gè)相組成:一是固定相,,它或者是固體物質(zhì)或者是固定于固體物質(zhì)上的成分,;另一是流動(dòng)相,即可以流動(dòng)的物質(zhì),,如水和各種溶媒,。當(dāng)待分離的混合物隨溶媒(流動(dòng)相)通過固定相時(shí),,由于各組份的理化性質(zhì)存在差異,,與兩相發(fā)生相互作用(吸附、溶解,、結(jié)合等)的能力不同,,在兩相中的分配(含量對(duì)比)不同,而且隨溶媒向前移動(dòng),,各組份不斷地在兩相中進(jìn)行再分配,。與固定相相互作用力越弱的組份,隨流動(dòng)相移動(dòng)時(shí)受到的阻滯作用小,,向前移動(dòng)的速度快,。反之,與固定相相互作用越強(qiáng)的組份,,向前移動(dòng)速度越慢,。分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單一組份,,從而達(dá)到將各組份分離的目的,。
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