ELISA酶聯(lián)接免疫吸附劑測定實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋流程
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定 ( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱,,是一種檢測方法,,標(biāo)準(zhǔn)品是相對于具體的物質(zhì)有具體的標(biāo)準(zhǔn)品。ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子,,標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn),。ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋流程:
1、粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,,讓因運(yùn)輸沾到管蓋,、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。
2,、根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末全溶解,。
注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,,槍頭帶出部分蛋白,,待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3,、標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:
(1)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:
若血清,、血漿,、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。
(2)耗材準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,,寫上S1-S7、空白,。
(3)梯度稀釋:
根據(jù)說明書,,每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,,吹打10次混勻,,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,,吹打10次混勻,,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度,。
(4)空白:
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。注意:梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),渦旋震蕩混勻后可短暫離心,,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個(gè)濃度,。
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