以下是奧林巴斯 CKX53 正置生物教學(xué)顯微鏡的一些使用技巧:
奧林巴斯CKX53顯微鏡樣品準備技巧
切片制作:如果觀察的是組織切片,,切片要盡量切得薄而均勻,,厚度一般在 5-10 微米左右,,這樣光線更容易透過,,圖像更清晰。例如觀察植物葉片的葉肉細胞,,切片過厚會導(dǎo)致細胞重疊,,難以看清細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
樣品固定與染色:對于細胞等樣品,,固定可以防止細胞變形或移動,,便于觀察。染色時要根據(jù)觀察對象選擇合適的染色劑和染色時間,。如觀察細胞核時,,可用甲基綠 - 吡羅紅染液,染色 5-10 分鐘,,能使細胞核呈綠色,,細胞質(zhì)呈紅色,便于區(qū)分,。
奧林巴斯CKX53顯微鏡光源調(diào)節(jié)技巧
根據(jù)樣品特性調(diào)節(jié):如果樣品本身顏色較淺或透明度較高,,如透明的微生物或細胞,光源亮度應(yīng)適當(dāng)調(diào)低,,避免光線過強導(dǎo)致圖像發(fā)白,,失去細節(jié);對于顏色較深或不透明的樣品,,則需要適當(dāng)增加光源亮度,。
調(diào)節(jié)色溫:可根據(jù)觀察需求調(diào)整色溫,一般來說,,觀察活細胞等需要真實色彩還原的樣品時,,選擇接近自然光的色溫;觀察熒光樣品時,,可根據(jù)熒光顏色選擇合適的色溫來增強對比度,。
奧林巴斯CKX53顯微鏡聚焦與成像技巧
低倍鏡找視野:先用低倍物鏡(如 4X 或 10X)找到樣品的大致位置和輪廓,將感興趣的區(qū)域移至視野中央,,低倍鏡下視野范圍大,,更容易找到目標。
高倍鏡調(diào)清晰:轉(zhuǎn)換到高倍物鏡(如 40X 或 100X)后,,使用細調(diào)焦旋鈕緩慢調(diào)節(jié)焦距,,使圖像達到最佳清晰度。在高倍鏡下,,微小的焦距變化都會對圖像清晰度產(chǎn)生很大影響,,所以調(diào)節(jié)要格外小心。
利用景深:對于有一定厚度的樣品,,可以通過微調(diào)焦距,,觀察樣品不同層面的結(jié)構(gòu),,利用景深來獲取更多信息。
奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察方法選擇技巧
明場觀察:適用于觀察具有明顯顏色和形態(tài)差異的樣品,,如染色后的細胞,、組織切片等。調(diào)整孔徑光闌可改變圖像對比度,,縮小光闌可增加對比度,,但會降低亮度。
相襯觀察:對于透明或折射率差異小的樣品,,如活細胞,,相襯觀察能將細胞的厚度、折射率等差異轉(zhuǎn)化為可見的明暗對比,,更清晰地觀察細胞的形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu),。使用時要將相襯環(huán)準確轉(zhuǎn)入光路,并調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌,。
熒光觀察:如果樣品進行了熒光標記,選擇合適的熒光激發(fā)塊和濾光片,,根據(jù)熒光強度調(diào)節(jié) ND 濾鏡,,避免熒光過強或過弱影響觀察效果。同時,,要注意熒光的淬滅問題,,盡量縮短觀察時間。
奧林巴斯CKX53顯微鏡圖像記錄與分析技巧
拍照參數(shù)設(shè)置:如果使用相機連接顯微鏡進行拍照,,要根據(jù)樣品的亮度,、顏色等設(shè)置合適的曝光時間、增益,、白平衡等參數(shù),,以獲得高質(zhì)量的圖像。
圖像測量與分析:利用顯微鏡配套軟件中的測量工具,,可對樣品的長度,、面積、角度等進行測量,。還可以進行圖像拼接,、對比度調(diào)整、色彩平衡等處理,,以便更好地展示和分析樣品特征,。
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