沒食子酸又名五倍子酸,,是一種有機酸,,多酚類有機物,。名稱為3,4,5-三羥基苯甲酸,化學式為C7H6O5,。它廣泛存在于五倍子,、漆樹、掌葉大黃,、大葉桉,、山茱萸等植物中,。沒食子酸易溶于水、醇和醚,;具有酚及羧酸的性質(zhì),。制備方法有酸水解法,、堿水解法,、發(fā)酵法、酶法等,,在制藥,、墨水、染料,、食品,、有機合成等方面有廣泛的應用。沒食子酸是中藥材提取物,,具有多種生物活性,,比如抗炎、抗氧化,、抑菌等作用,。沒食子酸與三價鐵離子生成藍黑色沉淀,是藍黑墨水的原料,。
高效液相色譜法(HPLC)是檢測沒食子酸含量的常用方法,。
色譜條件:反相C18色譜柱,柱溫25℃,;以甲醇和0.5%的磷酸為流動相,,流速0.8-1ml/min,進樣量10-20ul,;紫外檢測器,,波長273nm。確保具有良好的線性關系和回收率,,標準偏差在規(guī)定的范圍內(nèi),。 樣品制備:精密稱量樣品1g,置于50ml容量瓶中,,加入30ml甲醇,,超聲1h。加入甲醇,,定容到刻度,,搖勻,過濾,。 標準品制備:稱取沒食子酸標準品2mg,,放入50ml容量瓶中,,用甲醇定容到刻度,搖勻備用,。 標準曲線制作:梯度稀釋沒食子酸標準品,,至少6個點,分別用甲醇定容到刻度,,搖勻,。以上述的色譜條件,進樣到hplc,,測定色譜圖,,記錄數(shù)據(jù)。以濃度為橫坐標,,峰面積為縱坐標,,制作標準曲線,計算回歸方程和回收率,,確保具有良好的線性關系,。 樣品測定和計算:在色譜條件下,吸取樣品樣品溶液10ul,,進樣測定色譜峰面積,。如果濃度過高,先稀釋,,再進樣,,確保峰面積在標準曲線范圍內(nèi)。根據(jù)回歸方程和樣品的色譜峰面積,,可以計算出樣品沒食子酸的含量,,考慮回收率。
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