手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應用于生物分析領域的工具，其工作原理主要基于分子大小差異進行分離,。利用柱內(nèi)固定相中孔隙與分子間的物理作用來實現(xiàn)分離,。具體來說，聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選,，較大的分子無法通過尺寸較小的孔道,，只有較小的分子才能通過這些孔道，從而實現(xiàn)不同分子尺寸的分離,。其優(yōu)點在于其分離速度快,、操作簡單、分離效果好,。此外,，該技術不依賴于分子之間的親和性或化學性質(zhì)，因此適用于各種生物大分子,，如蛋白質(zhì),、多肽和核酸等的分離。
尺寸排阻色譜柱在使用過程中可能會遇到以下一些常見問題：
1,、柱效與峰形問題
柱效下降：可能是由于樣品與流動相未過濾,，雜質(zhì)堵塞柱子導致。若出現(xiàn)此現(xiàn)象,，需用合適的溶劑沖洗柱子,，如參考說明書、操作手冊等文件進行沖洗操作,。另外,，若使用的流動相含有有機溶劑，也可能導致柱效下降,。
峰形異常：包括峰型變寬,、分岔、分離度下降等,。這可能是進樣量超過柱體積的5%,，或樣品濃度過高、粘度大,，使樣品無法以同一速度通過色譜柱,，產(chǎn)生“指形效應”。此時應控制進樣量和樣品濃度，保證樣品粘度與流動相一致,。
出現(xiàn)鬼峰：若不是溶劑與流動相差異導致的基線波動,，需通過排除法，如進空白溶劑,、換柱子等,，找到雜峰、鬼峰的來源并解決,。
毛刺峰：通常是柱身中進了空氣所致,，可通過長時間低流速的流動相沖洗去除氣泡。
2,、保留時間漂移問題
流動相因素：若流速穩(wěn)定,，可能是流動相未完q混勻，導致洗脫強度不斷變化從而使保留時間漂移,。需確保流動相充分混合均勻后再進行分析。
系統(tǒng)故障：若流速和壓力不穩(wěn)定,，可能是儀器泵液系統(tǒng)產(chǎn)生漏液,、故障等問題，需要實際排查修復,。
3,、色譜柱堵塞與柱壓問題
柱頭篩板堵塞：如果柱頭篩板處堵塞導致柱壓接近柱壓上限，可以通過反向沖洗色譜柱來解決,，但要注意將流出液體直接排至廢液桶防止二次污染,。常規(guī)的由雜質(zhì)吸附填料引起的壓力升高，可通過正向沖洗掉雜質(zhì)來解決,。
壓力超限：可能超過了色譜柱的最大耐壓,，導致填料被壓實或損壞，影響分離效果和柱壽命,。應立即降低壓力,，檢查并更換受損部件。
4,、使用壽命問題
雜質(zhì)影響：樣品和流動相中的雜質(zhì)會堵塞柱子,，縮短其壽命。因此樣品與流動相進樣前必須過濾,，流動相建議現(xiàn)配現(xiàn)用,。
使用不當：如在不適當?shù)膒H值、緩沖液種類或鹽濃度下操作,，以及在極d溫度或壓力條件下使用等,，都可能損害色譜柱。應嚴格按照操作規(guī)程使用和維護色譜柱。
5,、溶劑相關問題
溶劑不匹配：樣品溶劑與流動相的不一致可能會導致不同程度的干擾,，嚴重時會影響分離效果。一般要求溶劑與流動相完q一致,，或通過稀釋盡量保持接近,。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,，應在授權范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關法律責任,。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關權利,。
采購中心