超高效液相色譜是一種高效,、快速的分析分離技術(shù),,通常由高壓溶劑輸送單元,、低死體積的色譜系統(tǒng),、快速的檢測器,、快速自動進樣器和高速數(shù)據(jù)采集,、控制系統(tǒng)等組成,。這些組件的協(xié)同作用,,使得超高效液相色譜能夠?qū)崿F(xiàn)高效、快速,、靈敏的分析分離,。廣泛應用于醫(yī)藥、環(huán)保,、石化,、食品,、化工等行業(yè)。在醫(yī)藥領(lǐng)域,,它可用于藥物分析,、藥物代謝研究等;在環(huán)保領(lǐng)域,,它可用于水質(zhì)監(jiān)測,、空氣污染物分析等;在石化領(lǐng)域,,它可用于石油產(chǎn)品分析,、催化劑評價等;在食品和化工領(lǐng)域,,它可用于食品添加劑檢測,、產(chǎn)品質(zhì)量控制等。
超高效液相色譜的結(jié)構(gòu)主要包括以下幾個部分:
1,、輸液系統(tǒng)
高壓輸液泵:是UPLC系統(tǒng)中最重要的部件之一,,其功能是將流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統(tǒng)。高壓輸液泵應具備流量穩(wěn)定,、耐高壓,、耐腐蝕等特性,以確保分析的準確性和可靠性,。常見的輸液泵有往復式柱塞泵,、隔膜泵等。
梯度洗脫裝置:用于在分析過程中實現(xiàn)流動相組成的連續(xù)變化,,以提高分離效果,。梯度洗脫可以通過低壓梯度或高壓梯度的方式實現(xiàn),根據(jù)不同的分析需求選擇合適的梯度洗脫方式,。
在線脫氣機:用于去除流動相中溶解的氣體,,防止氣泡對分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。常用的脫氣方法有超聲波振蕩脫氣,、惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣等,。
2、進樣系統(tǒng)
進樣器:將待分析樣品引入色譜系統(tǒng),,包括手動進樣器和自動進樣器,。自動進樣器可以實現(xiàn)高通量、自動化的分析操作,,提高分析效率和準確性,。進樣器應具備良好的密封性、死體積小,、重復性好等特點,,以保證進樣的精度和穩(wěn)定性,。
針內(nèi)進樣探頭:可減少進樣時樣品的擴散和交叉污染,提高進樣的準確度和重復性,。
壓力輔助進樣技術(shù):利用壓力將樣品快速,、準確地注入色譜柱,進一步提高進樣效率和分離效果,。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱:是UPLC的核心部件,,由柱管和固定相組成,。柱管一般采用直型不銹鋼管,內(nèi)部填充有固定相填料,。固定相填料的粒徑通常小于2μm,,甚至達到1.7μm以下,以實現(xiàn)更高的分離效率,。色譜柱的長度一般在10-30cm之間,,內(nèi)徑為2-5mm。
保護柱:安裝在色譜柱之前,,用于保護色譜柱免受樣品中的雜質(zhì)和顆粒物質(zhì)的污染,,延長色譜柱的使用壽命。保護柱的填料粒徑較大,,一般為5-10μm,。
柱溫控制器:用于控制色譜柱的溫度,保持柱溫的穩(wěn)定,。柱溫的變化會影響固定相的性質(zhì)和分離效果,,因此需要精確控制柱溫。
4,、檢測系統(tǒng)
檢測器:用于檢測經(jīng)色譜柱分離后的樣品組分,,并將濃度變化轉(zhuǎn)化為光學或電學信號。常見的檢測器有紫外-可見吸收檢測器,、二極管陣列檢測器,、熒光檢測器、示差折光檢測器,、電化學檢測器等,。不同的檢測器具有各自的適用范圍和特點,可根據(jù)分析需求選擇合適的檢測器,。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):將檢測器檢測到的信號進行采集,、處理和分析,得到樣品的色譜圖和相關(guān)數(shù)據(jù),。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)通常包括計算機軟件和硬件設(shè)備,,能夠?qū)崿F(xiàn)數(shù)據(jù)的采集,、存儲、處理,、分析和報告生成等功能,。
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