衡量凝膠成像分析系統(tǒng)性能的關鍵技術參數(shù)包括光學性能參數(shù),、成像參數(shù)、分析軟件參數(shù)等多個方面,以下是具體介紹:
光源強度與均勻性
強度:足夠的光源強度是保證弱信號樣品能夠被清晰成像的基礎,,強度越高,,可檢測的樣品熒光或化學發(fā)光信號下限越低,對于低表達量的核酸,、蛋白質等樣品檢測更有利,。
均勻性:光源均勻性好,能確保凝膠上各個區(qū)域受到的光照強度一致,,使成像結果中條帶的亮度和顏色均勻,,避免出現(xiàn)明暗不均的現(xiàn)象,有利于準確分析條帶的強度和形狀,。
濾光片性能
波長準確性:濾光片的波長準確性決定了能否精確地選擇特定波長的光,,對于多色熒光成像等應用至關重要,準確的波長選擇可以有效分離不同熒光標記的信號,,避免信號之間的干擾,。
帶寬:帶寬較窄的濾光片可以更好地過濾掉雜散光,提高圖像的對比度和分辨率,,使熒光信號更加純凈,,背景噪音更低。

分辨率
圖像分辨率:通常用像素來表示,,如 4800 萬像素等,,高分辨率能夠清晰地分辨凝膠上的細微條帶,即使是分子量相近的核酸或蛋白質條帶也能區(qū)分開來,,有助于準確分析條帶的數(shù)量、位置和形態(tài),。
空間分辨率:指系統(tǒng)能夠分辨的兩個相鄰物體之間的最小距離,,空間分辨率越高,對凝膠上相鄰條帶的分辨能力越強,,能夠更精確地測量條帶的寬度和間距,。
靈敏度
最-低檢測限:表示系統(tǒng)能夠檢測到的最小熒光或化學發(fā)光信號強度,低檢測限意味著系統(tǒng)可以檢測到極微量的樣品,,對于研究低豐度表達的基因或蛋白質非常重要,。
量子效率:成像設備(如 CCD 或 CMOS 相機)的量子效率越高,對光子的捕捉能力就越強,,能夠將更多的光信號轉化為電信號或數(shù)字信號,,從而提高系統(tǒng)的靈敏度。
動態(tài)范圍
線性動態(tài)范圍:指系統(tǒng)在能夠準確測量的信號強度范圍內,,輸出信號與輸入信號呈線性關系的范圍,。寬線性動態(tài)范圍可以保證在檢測不同濃度的樣品時,信號強度與樣品量之間都能保持準確的線性關系,便于進行定量分析,。
動態(tài)范圍跨度:即系統(tǒng)能夠檢測到的最-強信號與最弱信號之間的比值,,跨度越大,說明系統(tǒng)能夠同時準確檢測到的信號強度范圍越廣,,無論是高表達量的強信號樣品還是低表達量的弱信號樣品,,都能在同一成像中得到準確的顯示和分析。
圖像分析功能多樣性
條帶分析:能夠自動識別和分析凝膠圖像中的條帶,,包括條帶的數(shù)量,、位置、強度,、面積等參數(shù)的測量,,還可以進行條帶的比對和匹配,用于不同樣品之間的差異分析,。
分子量計算:根據(jù)已知分子量的標準品條帶,,準確計算出未知樣品條帶的分子量,為蛋白質和核酸等生物大分子的鑒定和分析提供重要依據(jù),。
數(shù)據(jù)準確性和重復性
定量準確性:在對條帶強度,、含量等進行定量分析時,軟件的計算結果應具有較高的準確性,,與實際樣品的含量或濃度具有良好的相關性,,能夠為實驗提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
重復性:對于同一樣品的多次成像分析,,軟件應能夠給出穩(wěn)定,、一致的結果,重復性好的軟件可以減少實驗誤差,,提高實驗的可靠性和可重復性,。